- 讲师:刘萍萍 / 谢楠
- 课时:160h
- 价格 4580 元
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特殊组织石蜡切片制作
在这一点上须明确:组织只要是经过适当的固定、脱钙(如果需要),完全脱水,透明和浸蜡等程序,切制时切片刀锋利以及切片机调整合适,有99.9%的组织都切割制出相当好的切片。只有在极罕见情况下组织虽经上述正确处理仍难切制。当遇到此种情况时,可采用下述方法弥补。
切制困难主要有两种情况:(1)组织太硬;(2)切制时组织易碎。(如皮肤、骨骼或血凝块)
无论是组织切制遇到困难还是组织未做先期的防护处理,均可将组织浸入香柏油中软化,然后再以二甲苯洗去香柏油,重新浸蜡包埋,再以常规方法切片。
切片时组织易碎:
不管蜡块的切面是否用冰块冷却,(组织含多量血液时最易碎)可在每次切片时在蜡块面上用火棉胶覆被;将蜡块切面擦干,用毛笔蘸取1%火棉胶液涂在切面上,稍停数秒钟待火棉胶干燥,再按常规切片。每切一张蜡块须涂一次火棉胶膜。须注意的是当附贴这种切片除去皱褶时,蜡片的胶面应向上,而水温要比通常略高以抵消胶膜的作用。切片干燥后在二甲苯脱蜡之前还要用等量酒精和乙醚除去火棉胶膜。
第五节 石蜡切片的异常及处理
一张理想佳良的切片,除组织固定适当和染色清晰之外,还应具备:薄、平整,无皱褶压缩,无裂损抓迹及擦痕,同时贴片排列密集,整齐位置适当,透明度好,封片用胶适量,盖玻片端正,无气泡等。
一、 影响切片质量的因素(表一)
制片程序 影响因素
取材 组织形态不规则,过大,厚薄不均
组
织
的
处
理 固定
脱水
透明
浸蜡
包埋 不及时:固定液选择不当
脱水不良;或时间过长
透明过长;或透明不足
时间不当;石蜡质量不纯,熔度选择不当
石蜡的硬度组织位置安排不当,包埋不平、碎组织散乱
切片 切片刀不够锋利,刀身角度固定不当
切片机性能掌握不够,保养不当
技术熟练程度不够
二、 石蜡切片中的异常及原因和处理方法(表二)
异常表现 原因和处理方法
切片纵裂或纵断 1、刀刃损,须磨、鐾。
2、刀口粘附细丝维,须擦净刀口。
3、组织内有细小过硬异物或骨质等。剔除异物,骨质脱钙。
切片弯曲或滚卷 1、刀钝须磨或鐾。
2、刀的倾角过大,调整。
切片厚薄不均,宽窄相间,或在每张切片上有厚薄区带 1、切片机调整螺旋须紧固。
2、组织过硬,需用软化剂处理,湿润组织切面,稍冰冻,均匀而慢切。
3、刀的倾角过大,须调整。
切制时组织破碎 1、刀钝,须磨。
2、蜡太软,须用冰块处理蜡块切面。
3、蜡内形成冰晶,凝固时冷却得慢或含水及透明剂,须重新脱水。
4、温度过高使组织变硬变脆,先用温水浸润而后切。若有过多的胶质,则可浸入70%酒精甘油软化后切片。
切片带呈弧形弯曲 1、组织形状不规则,蜡边缘区不平行并与刀刃不平行。
2、由于阻力不同,切片带组织内成分复杂,向阻力小的方向弯曲,修蜡块应视组织情况将蜡块切修成倒梯形,阻力大的一侧窄些,小的一侧宽些。
3、切片过厚,刀角偏大,刀钝须磨或鐾调整厚度及刀角,选择锋利处切片。
组织压缩,切片变窄,切片周围蜡边粘连使皱褶不易展开。 1、蜡块被压缩,系由于刀刃斜面不平,须研磨、鐾刀。
2、组织内纤维成分过多,细心处理组织。
3、组织浸蜡不足,石蜡硬度不够,室温过高,冰蜡块增强蜡块硬度或选换硬蜡。
4、组织块不必要的过大。
切片出现抓痕和擦迹 1、刀口不清洁,时时擦净刀口。
2、刀钝+组织内结缔纤维较多,其中还有钙化灶,异物、毛、发、线。剔除异物,选择刀口锋利处切片。
3、刀刃有细缺口,须磨刀。
间歇出片 刀、刀座、蜡块固定过松,须旋紧螺旋。
切片带中组织皱褶(呈泡样皱褶) 1、蜡块组织双侧留有蜡边,切片前组织两侧石蜡全部切除。
2、组织厚薄不均脱水变形,包埋不平,取材时注意厚薄均匀,注意组织脱水处理,包埋要平整。
3、碎组织包埋时排列不整齐,密集、组织成分较复杂。包埋应将碎组织排列密集整齐,切片水温不宜过高,摊片后尽量缓缓拉展。
切片不成带 切片贴在蜡块上 1、刀钝,擦净刀口,选锋利处切。
2、组织内纤维成分过于集中(如皮肤)消化道组织切片时将皮下组织或浆沫置于下面。
切片贴于刀口 1卷刀、磨刀。
2刀口粘附石蜡过多,擦净刀口。
〔注〕:切制石蜡切片遇到障碍大多数是:(1)刀钝或刀刃受损。(2)蜡块或切片刀的调整螺旋或是紧固螺旋拧不紧。因此,有经验的切片者在开始切制切片之前应习惯地反复核查(1)(2)这两点。
责编:刘卓
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