医药学论文：探讨牛大力对小鼠免疫功能的影响

1材料与方法
12药物与制备醋酸泼尼松片由广东华南药业有限公司生产(批号：071104)。牛大力购于广州致信中药饮片有限公司(批号：070701),制备方法：取牛大力干燥药材，用10倍体积的蒸馏水浸泡1 h，加热煮沸2 h，趁热过滤，残渣再加6倍体积的蒸馏水，加热煮沸1 h，合并2次滤液，浓缩至1 g /mL浓度备用，用时加蒸馏水稀释至所需浓度。
14牛大力对正常小鼠免疫器官质量的影响[1-2]取KM小鼠60只，随机分为5组：空白组，醋酸泼尼松组(剂量为40 mg·kg-1·d-1)，牛大力高、中、低剂量组(剂量分别为20、10、5 g·kg-1·d-1)。每天灌胃给药1次，连续给药12 d。末次给药1 h后，将小鼠脱颈椎处死，称体质量，取脾脏和胸腺，用电子天平称质量，计算脾脏和胸腺指数(w)：w脾=m脾/mbody，w胸腺=m胸腺/mbody。
16牛大力对免疫低下小鼠免疫器官质量的影响取KM小鼠60只，随机分为5组：空白组，模型组，牛大力高、中、低剂量组，给药剂量同14项下。除空白组外，其他各组小鼠上午灌胃给予40 mg·kg-1·d-1醋酸泼尼松，空白组给予等容积的蒸馏水，下午牛大力组小鼠灌胃给予相应药物，空白组和模型组灌服等容积的蒸馏水，连续12 d。末次给药1 h后，处死小鼠，按14项下方法计算脾脏指数与胸腺指数。
18牛大力对鸡红细胞致小鼠血清溶血素抗体形成的影响在鸡血中加入5倍体积的灭菌Alsever溶液，离心洗涤，用生理盐水配成体积分数5%生理盐水鸡红细胞混悬液。补体的制备：将2只豚鼠心脏采血，离心后分离血清，用10倍生理盐水稀释。取KM小鼠72只，随机分为6组：空白组，模型组，醋酸泼尼松组(剂量为40 mg·kg-1·d-1)，牛大力高、中、低剂量组(给药剂量同14项下)。除空白组外，各组小鼠先腹腔注射体积分数5%生理盐水鸡红细胞混悬液02 mL进行免疫，然后灌胃给药1次，连续12 d。末次给药后1 h，眼眶静脉取血，3 000 r/min离心10 min，取30 μL血清用生理盐水稀释100倍，取稀释后的血清1 mL，与体积分数5%生理盐水鸡血细胞混悬液05 mL、体积分数10%补体05 mL混合,在37℃恒温箱中保温30 min后，0℃冰箱中止反应，然后离心，取上清液于分光光度计540 nm处比色，测D值，另设不加血清的空白对照，取其上清液作为比色时调零的基准。
110统计学方法采用SPSS 115统计软件进行分析。用单因素方差分析进行统计学显著性分析。组间差异显著性采用单因素方差分析中的LSD方法进行多重比较检验。