医药学论文：黄芪的提取影响因素研究

【摘要】 目的 探索黄芪提取影响因素的主要范围。方法 采用紫外分光光度法测定黄芪皂苷、多糖含量,比较不同乙醇浓度、温度对水提和醇提黄芪的影响。结果 60%~80%乙醇浓度范围是醇提工艺优化的主要考查范围;60~100℃温度范围是水提、醇提工艺优化的主要考查范围。结论 该研究结果可以为不同需要的提取工艺设计提供参考。

　　【关键词】 黄芪 提取方 乙醇浓 温度

　　Effecting factors of extracting astragalus root

　　CAO Yu-chao,SHAO Chang-jiang, HE Dian,et al.Lanzhou Taibao Pharmaceutical Co. Ltd, Lanzhou 730050,China

　　【Abstract】 Objective To explore the main effecting factors of extracting astragalus root.Methods The different extractions of astragalus root under different concentrations of ethanol and temperatures were compared. The contents of total astragaloside IV and polysaccharide were detected by UV. Results 60% to 80% of ethanol and 60 to 100℃ of temperature was the main effecting factors of extracting astragalus root.Conclusion The different extraction method should select the different range of ethanol concentration and temperature optimizing extraction process.

　　【Key words】 Astragalus root; extraction method; concentration of ethanol; temperature

　　黄芪(Radix astragali)为豆科植物蒙古黄芪[Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao]和膜荚黄芪(Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.)的干燥根。味甘, 性微温, 具补气升阳, 益卫固表、托疮生肌等功效。其化学成分有多糖、皂苷、黄酮等。现代药理研究证明,黄芪多糖和黄芪皂苷为其中的主要成分, 其中皂苷以黄芪甲苷为主,有着广泛的药理作用[ 1,2 ]。黄芪的有效成分提取报道较多,但文献报道所取的研究材料黄芪产地、品种等都不同,难以进行系统比较分析。本文采用同一研究材料,分别研究溶剂、溶剂浓度、提取温度对黄芪皂苷、黄芪多糖的影响,从中优选出黄芪皂苷、黄芪多糖提取率较高的影响因素范围。

　　1 仪器与试剂

　　1.1 仪器 UV-2450紫外分光光度计(日本导津);FA2004B电子天平(上海精密科学仪器有限公司);电热恒温水浴锅(北京科伟永兴仪器有限公司);电热恒温干燥箱(连云港医疗器械设备厂);VP30型真空抽滤泵(北京莱伯泰科仪器有限公司)。

　　1.2 试剂 黄芪甲苷标准对照品(中国药品生物制品检定所);葡萄糖(分析纯,莱阳化工实验厂,批号:20050615);香草醛,无水乙醇,苯酚,硫酸,氢氧化钠,均为分析纯;蒙古黄芪药材,陇西制药厂提供,并经兰州大学药学院生药研究所马志刚教授鉴定为豆科植物蒙古黄芪[Astragalus membranaceus (Fisch) Bge. Var.mongholicus (Bge) Hsiao];95%乙醇;蒸馏水自制。

　　2 方法与结果

　　2.1 黄芪甲苷标准曲线绘制[3] 精密称取黄芪甲苷标准对照品5.1mg,置于干燥的10ml容量瓶中,加适量90%乙醇于62℃水浴振摇使溶解,放冷后以90%乙醇定容。精密吸取0.15、0.30、0.45、0.60、0.75ml分别注入具塞试管中, 各加入90%乙醇至0.75ml , 再分别加入0.75ml8%香草醛试剂, 置于冰浴中缓缓加入7.5ml 72%硫酸摇匀, 放入62℃水浴中恒温20min, 取出冷却摇匀, 在30min内, 于波长544nm 处测定吸光度(A), 随行试剂空白。以标准溶液浓度为横坐标, 吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。回归方程为:Y = 0.0011X-0.0021, r2 = 0.9943(n=5),黄芪甲苷在102~510 mg/L范围内具有良好的线性关系。

　　2.2 葡萄糖标准曲线绘制 精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖标准品100.3mg, 置于100ml容量瓶中, 加蒸馏水至刻度, 摇匀。精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8ml分别置于50ml容量瓶中, 加蒸馏水至刻度, 摇匀。精密吸取上述各种溶液2.0ml于具塞试管中, 分别加入5% 苯酚溶液1.0ml, 摇匀, 迅速加入5.0ml浓硫酸, 振摇5min, 置沸水浴上加热15min, 然后置冷水浴中冷却30min, 随行空白, 在490nm 波长处测定吸光度。以标准溶液浓度为横坐标, 吸光度值为纵坐标绘制标准曲线[3]。回归方程为:Y=0.014X-0.0003,r2=0.9996(n=7),葡萄糖在8.024~56.168 mg/L范围内具有良好的线性关系。

　　2.3 提取乙醇浓度的选择 根据文献资料[4]在70%左右的醇浓度时黄芪皂苷的提取率较高,因此选择60%、70%、80%、95%的乙醇进行黄芪皂苷及黄芪多糖的提取。

　　2.3.1 提取方法 称取黄芪药材约5g,4份,分别以60%、70%、80%、95% 的乙醇水溶液煮沸提取,提取两次:第一次溶剂用量为药材量的10倍(质量体积比),提取时间90min;第二次溶剂用量为8倍,提取时间60min。提取液过滤、合并、冷却至室温,精密吸取25.0ml滤液于编号的蒸发皿中置于沸水浴挥去乙醇后进行皂苷测定;另精密吸取50.0ml滤液于编号并经干燥称定的蒸发皿中置于沸水浴将溶剂挥至近干,移至恒温干燥箱中在100~105℃烘干后放入干燥器内,进行浸膏得率及黄芪多糖的测定。同法提取6组。