- 讲师:刘萍萍 / 谢楠
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电阻抗法血细胞计数原理(库尔特原理)是将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中,将小孔管(也称传感器)插进细胞悬液中。小孔管内充满电解质溶液,并有一个内电极,小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。
如图:电阻抗原理示意图
当接通电源后,位于小孔管两侧的电极产生稳定电流,稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔(直径<100μm,厚度约75μm)向小孔管内部流动,使小孔感应区内电阻增高,引起瞬间电压变化形成脉冲信号,脉冲振幅越高,细胞体积越大,脉冲数量越多,细胞数量越多,由此得出血液中血细胞数量和体积值。
如图:血液分析仪计数原理示意图
要点2:
白细胞分类计数原理
根据电阻抗法原理,经溶血剂处理的、脱水的、不同体积的白细胞通过小孔时,脉冲大小不同,将体积为35~450fl白细胞,分为256个通道,其中,淋巴细胞为单个核细胞,颗粒少,细胞小,位于35~90fl的fl小细胞区,粒细胞(中性粒细胞)的核分多叶,颗粒多,胞体大,位于160fl以上的大细胞区,单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始细胞、幼稚细胞等,位于90~160fl的单个核细胞区,又称为中间型细胞。
如图:三分类血球分析仪工作原理示意图
光散射法白细胞计数和分类计数原理
容量、电导、光散射(VCS)法
1)利用电阻抗法原理测量细胞体积(V)。
2)利用电导(C)技术测量细胞内部结构:原理是利用高频电磁探针测量细胞内部结构,根据细胞核和细胞质比例、细胞内颗粒大小和密度来识别体积相同、但性质不同的两类细胞群体,如小淋巴细胞和嗜碱性粒细胞。
3)利用光散射(S)技术测量细胞形态和核结构:原理是利用激光照射进入计数区的每个细胞,根据散射光角度(10°~70°)的不同,提供每个细胞形态、核结构信息来鉴别中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞。
根据VCS原理,显示3种细胞散点图:DF1(体积和散射光)、DF2(体积和电导)、DF3(体积和电导,但只显示嗜碱性粒细胞群)。
如图:五分类血球分析仪原理示意图
要点4:
正常白细胞直方图,在35~450fl范围内将白细胞分为3群,左侧峰又高又陡为淋巴细胞峰,最右侧峰又低又宽为中性粒细胞峰,左右两峰间的谷区较平坦为单个核细胞峰。异常直方图意义见下表。
如表:白细胞直方图变化的部分原因
白细胞直方图变化 |
主要原因 |
淋巴细胞峰左侧异常 |
有核红细胞、血小板聚集、巨大血小板、未溶解红细胞、疟原虫、冷凝集蛋白、脂类颗粒、异形淋巴细胞 |
淋巴细胞峰右移,与单个核细胞峰左侧相连并抬高 |
急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、异形淋巴细胞 |
单个核细胞峰抬高增宽 |
原始或幼稚细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞增多、嗜碱性粒细胞增多、单核细胞增多 |
单个核细胞峰与中性粒细胞峰之间异常 |
未成熟的中性粒细胞、异常细胞亚群、嗜酸性粒细胞增多 |
中性粒细胞峰右移、抬高、增宽 |
中性粒细胞绝对值增多 |
直方图多区出现异常 |
以上多种原因引起 |
责编:刘卓
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