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解放军文职招聘考试抗酸杆菌的荧光法

来源:长理培训发布时间:2017-10-06 21:54:55

 抗酸杆菌的荧光法

在组织切片中大量的抗酸杆菌易于见到,少量时则难于寻找,用荧光法则比齐一尼氏染色易于找到。

操作方法:

⑴切片置入二甲苯,(1份花生油+2份二甲苯更好)脱蜡至水。

⑵在金胺,若丹明溶液中10分钟(60)

⑶自来水洗。

⑷盐酸酒精分化2分钟。

⑸自来水洗。

0.5%高锰酸钾液中2分钟。

⑺自来水速洗。

⑻吸水纸吸干。

⑼急速入80%酒精洗。

⑽吸水纸吸干。

⑾纯酒精。

⑿二甲苯透明,用荧光封固剂或DPX及中性树胶封固。

结果:抗酸杆菌一明亮的黄色荧光,背景不染色。

试剂配制:

金胺O(Auramino O)       1.5g

若丹明B(Rh oolamlire B)   0.75g

甘油                 75ml

酚结晶(50℃液化)         10ml

蒸馏水               50ml

 

四、梅毒螺旋体染色法

Levediti氏组织块整体染色法

1)切取2-4mm厚的组织块在10%福尔马林中固定24小时。

2)流水冲洗。

395%酒精24小时。

4)蒸馏水洗至组织下沉为止。

52%硝酸银溶液(暗处)每日换一次,3-4天。

6)置于焦性没食子酸—福尔马林还原剂1-2(焦性没食子酸4克,福尔马林5ml加水至100ml)

7)洗于蒸馏水。

8)石蜡切片5微米,脱蜡、封固。

结果:螺旋体黑色,背景竭色。

 

五、铬酸PAS(真菌类染色)

⑴石蜡切片2-3微米,脱腊常规至水。

4%铬酸氧化1小时。

⑶流水冲洗5分钟,蒸馏水洗2分钟。

⑷冷雪夫氏(Cold Sohiff)液,15-20分钟。

0.5%偏重亚硫酸钠水溶液5分钟(更换2)

⑹水洗5分钟。

⑺蒸馏水洗,至70%酒精洗2分钟。

⑻醛复红染液30分钟。

95%酒精洗(洗去多余染料)

⑽蒸馏水洗,入淡绿染液30秒钟。

⑾蒸馏水速洗(镜下观察)

⑿曲霉菌、念球菌属、细胞浆菌属、隐球菌属为红紫色。曲霉菌丝周边紫红色,弹力纤维紫色,背景绿色。

 

六、病毒包涵体染色法

1Mann氏甲基蓝伊红染色法

Mann氏甲基蓝伊红染色法,是一种病毒包涵体的染色法,在HE染色切片上包涵体就能显示出来,用这一染色法则更清楚。

操作方法:

1)切片脱蜡至水。

2)用Mann氏染液染色8-24小时(染液要新配制)

3)蒸馏水洗。

4)用碱性酒精分化(40%氢氧化钠2-3滴,无水酒精100ml)30秒钟。

5)两酮速脱水。

6)二甲苯透明、封固。

结果:Negri氏小体红色。

试剂配制:

Mann氏染液。

1%甲基兰水溶液     6ml

1%伊红水溶液       6ml

蒸馏水           28ml

 

2Nacchiavello氏染色

1)切片脱蜡至水。

2)以0.25%碱性品红水溶液染色30分钟。

3)用0.5%柠檬酸分化约3秒钟。

4)自来水洗。

5)用1%亚甲兰作对比染色15-30分钟。

6)水洗。

7)脱水、透明、封固。

结果:包涵体、立克次氏体均染红色,其余组织呈蓝色。

 

 

 

解放军文职招聘考试抗酸杆菌的荧光法.doc

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