解放军文职招聘考试色素染色法

 色素染色法

色素分为人为色素和自生性色素。人为色素是由于固定剂与组织中某些成分相作用而产生。例如福尔马林色素，这种色素在切片染色前可以酒精苦味酸或氢氧化钠水溶液处理除去；而含有升汞固定液所产生的汞色素则可用碘处理除去，含铬酸盐固定而产生的黄色沉着物则可用酸酒精处理除去。

在某些病理情况下，细胞代谢所产生和沉着的色素，如脂褐素、黑色素、含铁血黄素、嗜铬、嗜银颗粒及组织内的微量金属离子等，则需要一些特殊染色加以证明。

一、    含铁血黄素染色法：

在慢性淤血的脏器组织内常有含铁血黄素沉着，一般易于同其它色素鉴别，但在不易区分的情况下可作铁反应加以证明。

Perls氏普鲁氏兰反应：

（1）    石蜡切片脱蜡至水。

（2）    蒸馏水洗。

（3）    2%亚铁氰化钾（或钠）、2%盐酸等量混合液（用前混合）处理15-20分钟。

（4）    蒸馏水洗。

（5）    脱水、透明、封固。

结果：含铁血黄素呈蓝色（蓝黑色）。

二、    黑色素染色法：

黑色素是深褐至黑色的颗粒状色素，常见于皮肤色素细胞，恶性黑色素瘤。组织内大量存在时呈棕黑色，易于鉴别。但量少时则需用特殊染色来显示鉴别。

黑色素不能为有机溶剂溶解，但易于用强氧化剂漂白而脱色。另外，黑色素本身具有还原银液的能力。因此，用氨银可以将组织中的黑色素显示黑色。通过铁反应也可将其呈暗蓝色而显示出来。

Fontana氏染色法：

操作方法：

（1）    固定于10%甲醛的组织还能用含铬盐的固定液。

（2）    石蜡切片。

（3）    染色前一般步骤，按照常规进行。

（4）    置切片于蒸馏水中充分洗涤。

（5）    投入下列溶液中，并置于暗处12-18小时。

在5%硝酸银水溶液中滴加氨水，至其沉淀被溶解，然后再加5%硝酸银水溶液数滴，至溶液呈混浊为度。此液最好临用新鲜配制。

（6）    用蒸馏水洗2分钟。

（7）    以0.2%氯化金水溶液增色5-10分钟。

（8）    用蒸馏水洗。

（9）    投入5%硫代硫酸钠2分钟。

（10）    自来水洗。

（11）    如需复杂，可用苏木素—伊红染色法。

（12）    酒精脱水、二甲苯透明、树胶封固。

结果：黑色素呈黑色。

注意事项：

（1）    Perls氏溶液临用前新鲜配制，不宜久存再用。

（2）    Perls染色过程中，应避免用生锈及其它可能造成铁质的普通水洗，而应用蒸馏水洗。

（3）    Fontana氏染色法，切片在氨银溶液中浸染时，需在镜下来鉴别褐控制染色时间，以黑色素呈黑色为度，时间过长，会将脂褐素，橙色血质均染成黑色。

（4）    一般应另用一张切片进行脱黑色素对照。

附：脱黑色素方法：

（1）    切片常规脱蜡入水。

（2） 入0.1%-0.25%高锰酸钾水溶液内2-4小时，水洗再用1%草酸水溶液漂白水洗。或用氯化钾1克，70%酒精50毫升，浓盐酸1毫升，混合脱色液处理2-3小时。镜下控制以细胞内外黑色素完全消失为度。

（3）充分脱水。

（5）    常规脱水封片。