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解放军文职招聘考试特殊染色技术

来源：长理培训发布时间：2017-10-06 21:53:02

特殊染色技术

通常将切片的染色方法分为两大类，一种是普通染色法（见前），一种是特殊染色法。

普通染色即是经常应用的苏木素——伊红染色法。还有一种常规的染色方法。组织经过这一染色法，其形态结构可以全部显示。一般的组织变化和组织产物都可以通过这一染色法显示出来，所以称之为普通染色法。

特殊染色法是为了达到某些特殊的要求，或是为了观察特殊的组织结构，例如：观察间质的结构变化，需要作胶原纤维染色，弹力纤维染色或网状纤维染色。又如，要观察组织内某些物质的状况，例如糖，脂肪和粘液、纤维素等时，均需特殊显示的染色方法。

特殊染色的方法繁多，显示不同的物质需要不同的方法，显示相同的物质也有不同的方法。我们选择性地介绍常用的一些方法。操作时，应根据需要，结合手边的试剂及条件，选择合适的方法，并应不断地总结，摸索以提高特殊染色的水平。

第一节 结缔组织染色法

一般而言，疏松结缔组织、致密结缔组织、脂肪组织、网状纤维组织、软骨组织、骨组织和血液均属结缔组织。

结缔组织由细胞和大量的细胞间质构成。间质包括基质和纤维两种成分。疏松结缔组织和致密结缔组织的纤维有胶原纤维，弹力纤维和网状纤维。

光学技术切片的结缔组织染色是指胶原纤维，弹力纤维和网状纤维染色，而通常所说的结缔组织染色多指胶原纤维染色。

一、胶原纤维染色法：

胶原纤维由纤维母细胞分泌产生。纤维母细胞，纤维粗细不等直径在1－2微米之间，呈分枝状，相互交织，少量常呈明显的纤维状；成熟的和大量存在于组织时，则显均质性，具较强的的嗜酸性，在苏木素—伊红染色（简称HE染色）的切片上易于识别。但在某些情况下，它与肌纤维的鉴别是有困难的。例如纤维瘤或纤维肉瘤与平滑肌瘤或平滑肌肉瘤及横纹肌瘤及横纹肌肉瘤的鉴别。为此，适宜的采用某些特殊染色就十分必要了。如Ven Gieson氏染色法（胶原纤维呈红色，肌纤维呈黄色）；Masson氏三色染色法（胶原纤维呈绿色或兰色，肌纤维呈红色）。

1．Ven Gioeson氏苦味酸复红法（1889）

此法是用来区分胶原纤维和肌纤维的经典染色方法，习惯称之为V－G染色法。染液是苦味酸和酸性复红的混合液，胶原纤维被酸性复红染成淡红或红色，肌纤维被苦味酸染成黄色。

操作方法：

(1)切片脱蜡常规至水，蒸馏水洗。

(2)Weigent氏铁苏木素液染核。

(3)水洗（用自来水充分冲洗）。

(4)1％酸盐酸酒精分化

(5)流水冲洗。

(6)Ven Gieson氏苦味酸复红染色 1—5分钟。

(7)滤纸稍印干或用 95％酒精迅速脱色与脱水。

(8)无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封盖。

结果：胶原纤维红色，肌纤维黄色，核褐色。

试剂配制：

Ven Gieson氏苦味酸复红液：

1％酸性复红 10ml

苦味酸饱和水溶液 90ml

两液混合后加适量蒸馏水稀释备用。

注意事项：

1．苦味酸复红两液应分别保存，染色前取均量（等量）混合使用。

2．酸性复红易被水洗掉，而苦味酸易被酒精洗脱，故在分色脱水时都应快速。由于V-G为较强的酸性染液，切片放置过长易褪色。

2.Masson三色染色法

Masson三色染色法是由Mallory氏苯胺蓝菊黄G发展改良而来，但对于固定液有一定的选择性，虽然任何固定液固定后的组织可进行染色，但最好是用Zenker氏固定液或Bouin氏固定液固定组织。福尔马林固定的标本切片在染色前以3%升汞作第二次固定一小时以上，则可增强着色效果。