- 讲师:刘萍萍 / 谢楠
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切片技术
优良的切片技术取决于所有器械的透彻了解和丰富的实践经验。实验工作的每一方面都需熟练的技巧,这只有靠实践才能获得。早期练习如草率和不当,多年后还会反映出来:但要是达到了训练的高标准,以后就会一直保持下去。经良好训练和实践的技术工作者能在很短时间内制出第一流的切片。
第一节 切片刀
切片刀或许是切制良好切片的最主要因素,因为它较之切片机而言造成切片不良的机会最多。只有刀口无损,才能切制完整切片,如切片刀不够锋利、切片时会自行卷起或皱起,更不能顺利地将切片切成连续地长条带状,破碎、不完整。所以,锋利和调节良好的切片刀使切片易于操作。如可能,每人应有自己的刀,并自己保管,不仅能精心保护且因每个人操作习惯不同而利于使用。
一、切片刀的种类
根据切片刀的结构式样区分的主要有以下几种:
(a) (b) (c) (d)
a平凹形 b深平凹形; c平楔形; d双凹形
二、切片刀的选择
平凹形:用于滑动式切片机或某些轮转式切片机。
深平凹形:仅用于火棉胶切片,因为刀口较薄,用其切制硬固材料时刀叶会颤动。
平楔形:用于普通石蜡切片和巨检标本切片。
双凹形:用于摇动式切片机和滑动式切片机切割石蜡切片。
三、磨刀
理想的切片刀的刀刃应在两个平坦切割面间形成笔直细线。一把锋利的切片刀能将石蜡切片切到2微米并连续成条而无压缩。如果刀刃比细胞还厚,则它对细胞的破坏要比切割的大。因此,磨刀是从事切片技术的一项基本技能,必须锻炼和掌握。
磨石种类很多;有天然、人工或平板玻璃。天然磨石:宜仔细选用质地纯净无杂质并较硬的砚石,稍软而涩的用作“粗磨”;硬而细滑的用作“细磨”。
工业用金钢砂磨石;有多种规格和级度,细度均匀,一般多将最细的金钢砂磨在组织学上做“粗磨”,用以磨去损伤较重的切片刀刃上的较大缺口。
平板玻璃:裁取适当大小作磨石用,须在磨石面上加氧化铅等磨料,如普通磨石同样方法使用,优点是变换不同细度的磨粉或磨浆,可在一块玻板上作“粗磨”,“中磨”或“细磨”用。
磨刀石的大小可根据切片刀大小种类而异,磨刀时需加稀润滑油,肥皂水或水,用油较好,磨石用过后须拭掉磨料和小金属屑。最好是磨石固定装在一只盒内,磨石周围有刻槽便于排流多余的油和水。使用完毕立刻盖上盒盖以防落上污物或灰尘。如未除去这种灰尘会损伤石面并在砥磨时使刀刃发生缺损。
四、磨刀方法
磨刀的手法各人有所不同,但有一个原则,必须将刀口全部磨到,使其平衡一致。同时还要保持磨刀的平度。切片的中部使用较多,耗损也较大,磨刀时应照顾到它的平衡,以免使用日久后刀口形成月牙状,影响切片质量。
磨石的方法包括手工磨刀和磨刀机自动磨刀,本节着重介绍手工磨刀的具体方法,机器自动磨刀应在仔细阅读使用说明后按操作程序执行。
磨刀的步骤:
1、将磨刀放在一条粗面(或铺一层湿布)实验台上使在砥磨时不会活动。
2、在磨石面中央滴入少量的稀润滑油或液体石蜡并均匀抹开,以便增加磨擦密度。
3、将刀柄和刀夹装在切片刀上使刀刃向前,平放在磨石面上,刀跟大致位于磨石的中央。
4、砥磨时手指应保持正确位置以使用力均匀易于滑动,以右手握住刀柄,左手握住刀壳,刀刃朝向磨刀者前方,将切片刀从磨石的右下角刀端向磨石的左上角向前斜推进至刀跟,将刀刃从上面翻转;翻转时刀夹不能离石,此时刀刃向着磨刀者。将刀横向移动使刀跟的刀刃处于磨石前端的中心,再斜着拉回。此时再将刀刃从上面翻且将刀横向移动使切片刀在磨面上处于原来的位置。(见图解)这样每完成一次要有八个动作,切片刀应与磨石全部接触到,反复进行。砥磨时左右手均匀压迫整个刀刃,避免倾斜,并要防止油腻的手指从刀面滑开。
由于手法的习惯不同,也可以从磨石的左上角向右下角推进,翻转后再从左下角向右上角拉回,只要将刀与磨石全部磨到,这是没有什么区别的,简便快捷的方法也同样有效。熟练后可使动作速度加快和将刀刃磨利,但在练习中过早地追求速度会将刀刃磨钝或割破手指。
5、上述过程持续到磨掉缺口,对损伤较大的切片刀须用粗细两种磨石,在粗磨石上磨掉大缺口,再在细磨石上磨锋利。
向前推进式磨刀法,磨擦较快,效率较高,大约一把迟钝的切片刀只需要20分钟左右就磨锋利。然后即可准备鐾刀。
五、鐾刀
鐾刀是将已磨快了的刀刃鐾使锋利更加致密。最好的鐾刀皮是用马臀部皮肤制成的,叫“马革鐾刀皮”。分两种类型(1)能弯曲的(手持的)。(2)绷紧的。所有鐾刀皮的类型依个人爱好而定。像磨刀石一样,鐾刀皮面须无污物和灰尘。
鐾刀的方法:
手握刀柄,不用刀壳,以刀背在鐾刀带上后退式的向上移动(就是说与磨刀的方向相反),反转后再以刀背后退式向下拉回。反复这个动作进行磨鐾,一般3—5分钟即可。其鐾刀技术动作完全与磨刀相反,练习使用鐾刀皮的全部长度均匀地鐾完整个刀叶。在每次鐾到头时须练习如何翻刀以免切到鐾刀皮上。
检查切片刀是否锋利,通常以手指轻轻试摸刀口的锋刃,如果感到好像一排极其细密针刺的触觉,说明刀口已锋利。如用放大100倍显微镜下观察,可见刀口表现一种非常细的断续线,如一排极其细密而又均匀的锯齿,即所谓锋芒。如果没有出现,仍须再磨。
磨刀和鐾刀的方法图解(略)
切片刀磨好后应细心爱护。切片刀平时放在刀盒内,不要任意放在实验台上,不要用它切制明显钙化的组织,这样,切片刀锋利的刀刃就不会轻易的被损坏了。
责编:刘卓
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