解放军文职招聘考试大致正常骨髓象

 掌握：血象检验结果及骨髓象检验结果的正常值，骨髓各系统各阶段细胞的正常形态特征，正常骨髓象报告的书写方法。

熟悉：其他系细胞的正常形态。

一般符合列情况者，可视为大致正常骨髓象。

1．骨髓有核细胞增生活跃。

2．粒红比值：2~4：1。

3．各系统各阶段细胞比值在正常范围，形态无明显异常。

①粒系：约占40~60%，其中原粒＜2%，早幼粒＜5%，中性中幼粒8%~12%，中性晚幼粒10%~15%，中性杆状核15%~20%，中性分叶核12%~20%，且杆状＞分叶，嗜酸＜5%，嗜碱＜1%。

②红系：约占20%~25%，原红＜1%，早幼红＜5%，以中、晚幼红细胞为主、各约占10%，形态无异常。

③淋巴细胞系：约占15~25%，均为成熟淋巴细胞，原幼淋巴细胞小儿偶见。

④单核及浆细胞系：各＜4%。无原幼单及原幼浆细胞。

⑤巨核系：通常在1.5×3cm的涂片膜 上,可见7~35个巨核细胞。其中原巨0或罕见，幼巨0~5%，颗粒巨10~27%，产板巨44%~60%，裸核0~30%。血小板易见，呈堆存在。

⑥其它细胞：可见少量非造血细胞，如组织细胞、内皮细胞、肥大细胞、破骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞等。

⑦核分裂象少。

⑧无异常细胞及寄生虫。

⑨各系细胞形态正常。

第六节   临床血液生化和血细胞化学

一、细胞化学染色（4学时）

掌握：NAP染色、铁粒染色、POX染色方法、结果判定、正常值及临床意义。

熟悉：NAP染色、铁粒染色、POX染色方法的试剂配制。

了解：NAP染色、铁粒染色、POX染色方法的。

（一）碱性磷酸酶染色（NAP）

                    ———钙钴法

1.原理   细胞内的碱性磷酸酶在PH9.2~9.8时，将底物β-甘油磷酸钠水解，产生磷酸根，后者与其质液中的钙离子作用形成磷酸钙，再与硝酸钴起反应，形成磷酸钴，最后与硫化铵作用形成硫化钴黑色沉淀定位于胞浆中。

2.试剂

（1）备用试剂：①95%乙醇 ②2%CaCl₂ ③2%硝酸钴 ④1%硫化铵 ⑤β-甘油磷酸钠 ⑥Tris-HCl缓冲液(PH9.5):Tris6g溶于400ml水中,加0.1MHCl80ml, 调PH9.5, 加水至500ml

（2）孵育液(每次必须新鲜配制)：Tris缓冲液20ml，2%CaCl₂

20ml,β－甘油磷酸钠200mg。

3.方法

（1）新鲜血片用95%乙醇固定10min,取出，自然干燥。

（2）将孵育液放入45℃水浴箱中先预温5min后，再放入涂片孵育30min, 取出涂片(不冲洗)立即放入2%硝酸钴中5min，取出用自来水充分冲洗干净。

（3）放入1%硫化铵溶液（每次必须新鲜配制）中2min，用自来水冲洗干净，用核固红复染30min。

4. 结果

  阳性：中性粒细胞胞浆内有棕黑色沉淀。

  阴性：中性粒细胞胞浆内无棕黑色沉淀。

5. 正常参考值

  成人：积分 80分左右。

  儿童：因年龄而异。

6. 临床意义

（1）细菌：积分球菌↑↑>GN杆菌，病毒减低或无变化。但NAP积分正常 / ↓，不能除外细菌感染。

（2）慢粒↓↓，类白↑～↑↑。

（3）ALL↑，ANLL↓。

（4）AA↑↑，PNH正常 /  ↓。

（5）恶组↓↓，反应性组织细胞增多↑～↑↑。

（6）增性红细胞增多症↑，继发性红细胞增多正常 。

（7）激素治疗后NAP↑。

（8）妊娠期NAP↑。

7. 质量保证

（1）孵育液、1%硫化铵每次实验必须新鲜配制。

（2）Tris-HCl缓冲液的PH应控制在9.2~9.8之间。

（3）温度应严格控制在45℃左右（上下不超过1℃）。

（4）涂片在孵育液中准确温育30分钟。

（5）涂片从孵育液中取出时不能冲洗，应直接放入硝酸钴，否则实验失败。

（6）涂片从硝酸钴中取出时应用自来水冲洗3分钟，否则涂片太脏，结果不好观察。

（7）每次染色必须作对照。

（二）铁染色

1.原理   骨髓小粒中的含铁血黄素称细胞外铁，其中的三价铁与分子中的蛋白质结合不牢固，经稀盐酸处理后而游离，并能在酸性亚铁氰化钾溶液中产生普鲁士蓝反应。细胞内铁也可用此法显示。根据反应的强弱了解骨髓中铁的含量。

2.试剂

（1） 酸性亚铁氰化钾溶液

  200g/L亚铁氰化钾溶液       5份

浓盐酸                     1份

取200g/L亚铁氰化钾溶液置于试管中，缓缓滴加浓盐酸，边滴边摇匀，至出现白色沉淀，再滴加200g/L亚铁氰化钾溶液，亦边滴边摇匀，至白色沉淀消失为止，备用。

（2）2g/L核固红—硫酸铝溶液

取硫酸铝2g溶于100ml蒸馏水中，再加入核固红0.2g，置37℃水浴中1小时，并随时振摇，使溶解，过滤后使用。

3.方法

（1）            选髓粒丰富的骨髓片，用甲醇固定10分钟。

（2）            髓片上滴满酸性亚铁氰化钾溶液，染色30分钟。

（3）            用蒸馏水冲洗后，用核固红复染20分钟。

4.结果判断

  幼红细胞内出现蓝绿色颗粒为阳性。

5. 正常参考值

  正常：细胞内铁>20%，细胞外铁+~++。

  IDA：细胞内铁<15%，细胞外铁阴性。

6. 质量保证

（1）            需观察外铁时玻片最好作去铁处理，取材涂片后应尽量减少污染铁，最好立即进行染色。

（2）            亚铁氰化钾溶液少量配制，如与盐酸混合后出现蓝色必须重配。

（3）            酸性亚铁氰化钾溶液必须新鲜配制。

（4）            选择髓粒丰富的骨髓涂片。

（5）            胞外铁较规则，呈圆或椭圆，与细胞存在于同一平面，污染铁与细胞不在同一平面。

（6）            瑞氏染色后的骨髓片，用甲醇脱色后仍可作铁染色。

（7）  作阳性对照。

7.临床意义

（1） 细胞内、外铁“↓”、吞噬细胞内无贮存铁，可诊断为IDA。

（2） 细胞内铁“↓”、外铁“↑”、吞噬细胞内有贮存铁，可诊断为ACD。

（3） 细胞内铁“↑”、外铁“↑/N”、红细胞形态小、低色素，提示可能为Hb病。

（4） 细胞内铁“↑”、外铁“↑/N”、环形铁粒幼红细胞＞15%，可考虑为环形铁粒幼细胞性贫血（RAS）。

（5）MDS、AA：细胞内、外铁均“↑”。