亲水性药物脂质体管理论文

一，前言 脂质体作为一种新型的载药系统，今年来得到广泛的应用和研究。评价脂质体质量的 指标有外观、粒径分布和包封率等。其中包封率是衡量脂质体内在质量的一个重要指标。 对于亲脂性药物，由于其对磷脂膜的亲和性，可以在制备过程中得到很高的包封率，且不 易渗漏。而亲水性药物在制备时则必须包封在脂质体囊内部或多层脂质体层间的水性介质 中，除一些特殊药物外包封率普遍不高，且易泄露。制备中为了得到更大的包封率，不得 不增加囊内的容积，而这与控制脂质体在有效的粒径范围内又相互矛盾。以下将介绍一些 用于提高亲水性药物在脂质体中的包封率的方法。 二，制备方法 1，常规方法 对于一些亲水性药物，使用常规的制备方法也可以得到满意的包封率。胡静等（1） 用简单的薄膜水化-机械分散法研究了硫唑嘌呤（Aza）脂质体包封率的影响因素。这些因 素包括卵磷脂与胆醇摩尔比、缓冲液(PBS)pHPBS)pH)pHpH 值、水相用量及药脂重量比。通过正交设计 得到最佳处方所制得的 3 批硫唑嘌呤脂质体形态圆整，大小均匀，粒度范围 0.01～ 0.42μmμmm，包封率均达 30%以上。但在实验中发现药脂重量比增加时，包封率反而下降， 这说明 Aza 的利用率在减少。 吴骏等（2μm）使用逆相蒸发法制备阿昔洛韦ＡＣＶ脂质体，经过正交优化后，得到阿ＡＣＶ脂质体，经过正交优化后，得到阿脂质体，经过正交优化后，得到阿 昔洛韦ＡＣＶ脂质体，经过正交优化后，得到阿脂质体的平均粒径为 2μm19.8 ｎｍ，多分散系数为 0.158，包封率为 65%，且具有良 好的稳定性。作者将卵磷脂、胆固醇、油酸和去氧胆酸钠溶于乙醚，于室温搅拌下滴入ＡＡ ＣＶ脂质体，经过正交优化后，得到阿水溶液，使形成稳定的Ｗ/Ｏ型乳剂。型乳剂。2μm5℃减压蒸去乙醚，得乳白色混悬液，通过微孔 滤膜后，即得ＡＣＶ脂质体，经过正交优化后，得到阿脂质体。产品经离心加速实验表现出良好的稳定性。此实验通过选择 适当的油水体积比可使内相体积增加，提高包封率；同时加入Ａ了乳化剂可以防止脂质体的 粒径增大。 翟光喜等（3）也将表面活性剂胆酸钠引入Ａ脂质体的处方中制备了低分子肝素的柔性 纳米脂质体，此类脂质体具有高度的形变性，可由于经皮给药系统。制备方法就是简单的 将处方混合后至冰水浴中超声处理，再通过微孔滤膜即得。经正交优化后包封率可达到 33.1%。但该制剂的稳定性和储存中的渗漏作者并没有做进一步研究。陈鹰等（4）也研究 了双氯芬酸钠的柔性脂质体，试验将磷脂等脂溶性成分和胆酸盐溶于乙醚中，药物则溶解 在磷酸缓缓冲液中，混合后减压旋转挥干后再超声过滤。得到的脂质体包封率为 73.12μm%。 侯新朴等对低包封率的水溶性药物(PBS)pH如甲硝唑)pH进行疏水衍生化，其疏水链将药物分子 插入Ａ脂质体膜，包封率和稳定性都提高十多倍（5）。 在这些常规的制备方法中，首先应该对药物的性质有充分的了解。同时工艺参数的选 择，尤其是合适的油水相比及乳化剂的用量对于水溶性药物的包封率有很大的影响。在制 备过程中采用超声，加乳化剂的方法都可以有效地控制脂质体的粒径。 2μm，三维网状脂质体 亲水性药物在脂质体内包封的多少取决于在脂质体形成时其在囊内溶液和囊间溶液中 的分配，此比率越高，包封率也越高。因此提高囊内溶液的体积可以提高药物的包封率。 M.Brandl（6）等通过提高单位体积内磷脂的浓度，以增加在内相中的体积同时又不改变 脂质体的形状和大小，从而增加药物的包封率。它将磷脂溶解在水性介质中达到 2μm00300mM 浓度，形成一种半固体的糊状物，再用一步高压匀质法（7）使磷脂“强制水化”制 成了“Three-dimensionalliposomenetwork””。通过电镜观察，发现这种糊状物包埋了水溶性 的标记药物，而且还具有缓释作用。所谓一步高压匀质法就是将磷脂粉末和药物分散在水 或磷酸盐缓冲液中，轻微振摇后在 GMLab40 匀质机中高压匀质切割即得脂质体。 3，将药物引入Ａ制好的空白脂质体中 由于脂质体一般为混悬液，在储存和运输中难免出现渗漏，聚合等现象影响了包封率 和粒径。采用空白脂质体加药物的方法可能可以解决这一问题。 Anye 首先提出了前提脂质体（proliposome）的概念，将水溶性甘露醇分散在脂质体 膜材的乙醇溶液中，挥干乙醇制的粉状的前体脂质体，此前体脂质体是以甘露醇为主要支 架，磷脂膜粘附在其上的结构。该前体脂质体易于保存。药物则溶解在水中，临用前与前 体脂质体混合，药物随水分子进入Ａ脂质体内，即得含药脂质体制剂。翟光喜等（8）将此 方法用于低分子肝素，制得用于静脉注射的脂质体制剂。测得平均包封率为 37.3%。这种 制剂包封率主要受甘露醇与类脂的总量和配比以及混合的时间影响。在稳定性问题解决的 同时，也存在粒径较大且不易控制等问题。还须进一步的研究加以解决。他（9）还将肝 素加入Ａ少量 PBS)pH 成糊状，再加入Ａ商品化的 NatipideⅡ 空白脂质体，研磨后加入Ａ抗氧剂和防 腐剂，加 PBS)pH 稀释后即得。药物在研磨中被包入Ａ空白脂质体凝胶颗粒中，再加入Ａ大量的水 破坏凝胶状态，形成混悬液。试验所的包封率在 43%左右。该制备方法中，温度对包封率 又较大影响，温度升高时，脂质体流动性变大，膜内包封的药物易于渗漏。 邓意辉等（10）用主动载药法制备盐酸小檗碱脂质体，包封率得到大大的提高：被动 载药法得到的包封率仅有 13.3%，主动载药法的包封率最高可达 84.6%。他将膜材的乙醇 溶液在枸橼酸缓冲液中减压蒸发得到空白脂质体，依次加入Ａ盐酸小檗碱溶液和ＮａＨＣＯ型乳剂。 3 溶液调外水相ｐＨ值，水浴孵化即得。由于混合时内外水相不同的离子或化合物梯度， 有利于特殊药物（离子型药物）的包封，且制剂较为稳定（放置一年无分层现象，包封率 下降 8%）。研究发现加药顺序、孵化时间、孵化温度、外水相ｐＨ值等都对药物的包封 率有影响。由于采用主动载药法制备脂质体的包封率高、渗漏小，非常适合于工业化大生 产。 4，反复冻融法 亲水性药物脂质体无论是在制备还是储存过程中都存在一个渗漏的问题，药物分配在 外水相增多，使包封率降低。反复冻融法被证明是一种有效的保护药物不渗漏的方法。与 其他方法相比，冻融法具有操作简单，包封率高，药物避免接触有机溶媒等特点。张奇等 （11）使用了冻融法制备氟尿嘧啶脂质体，并考察了其稳定性。作者使用对水溶性药物包 封率较高的逆向蒸发法制备了 5-ＦＵ脂质体的混悬液后，置冰箱内反复冻融脂质体的混悬液后，置冰箱内反复冻融 3 次，发现药 物的包封率比冻融前明显提高（由约 2μm5%上升到 45%左右）且离心加速实验的稳定性也比 冻融前好得多。这是由于冰冻使磷脂周围药物浓度增高，在反复冻融过程中粒径小的脂质 体互相融合成稍大脂质体，粒径趋于均匀化，使脂质体包封率明显提高。但作者并没有控 制冻融后脂质体的粒径分布。 董泽民（12μm）在研究赖氨匹林的鼻腔给药脂质体时也使用了冻融法。他先将磷脂等制 成空白脂质体后，把药物和甘露醇溶于其中冻干，加入Ａ缓冲液振摇分散，再冻干即得。这 样制得的重建性脂质体的包封率为 55.94%。由于制作过程无需加热，尤其适用于对热不 稳定的水溶性药物。 WeiLiang 等（13）在研究含有 ATP 的免疫脂质体的制备时也使用到此方法。作者将 包有 ATP 的 PEG 修饰脂质体结合上单克隆抗体 2μmG4 以增加其靶性，在结合的过程中未发 现有 ATP 的泄漏。作者将脂质体材料和 PEG 溶于氯仿中旋转挥干成膜，加入Ａ溶有 ATP 的 缓冲液，强力蜗旋后反复冻融 5 次后过膜均化，再过柱分离得脂质体，再进行进一步化学 修饰。制备方法在冻融后过聚碳酸酯的膜可使脂质体的离径缩小（约 2μm00nm），且分布窄。 作者认为冻融法提高包封率的机理可能是形成了某种暂时的孔洞是药物在平衡前由外相进 入Ａ了内水相中。 5，使用糖保护剂防止载药脂质体的渗漏 有研究表明，在脂膜中加入Ａ蛋白，糖等类物质，会使其稳定性提高。李晓燕等（14） 探讨了具有疏水链的糖保护剂癸烷基葡萄糖（β-DG）对于延缓脂质体渗漏的影响。实验使 用超声法制备了水溶性药物盐酸氯喹的小单层脂质体，发现在制膜时加入Ａ β-DG，由于长 链的亲脂性，使其均匀的分散在双分子层中，改变了膜的通透性，不仅提高了脂质体对药 物的包封率（上升了 5%），还有效地防止了药物泄漏（降低了一个数量级）。证明了癸 烷基葡萄糖是一种有效的脂质体渗漏保护剂。但加入Ａ量不宜过多，因为过多的非脂类分子 进入Ａ脂膜，会影响脂膜的稳定性，反而会使泄漏量上升。 6，其他新进展 对于亲水性药物脂质体，最新研究并不局限于传统的脂质体制剂的研究模式，而是灵 活积极地采用其他剂型的优点和方法，提高药物的包封率和稳定性。 小分子水溶性药物在普通的水凝胶中可以被很快的释放出来，这是由于水凝胶中含有 大量的水分（＞90%）并且有很大的孔洞，因此达不到缓释的作用。近年来有人将此类药 物包裹在脂质体中，再分散在凝胶里，可以明显延缓药物的释放，药物穿透脂质层的过程 成为限速步骤。Marija（15）等研究了 5-氟脲嘧啶的凝胶脂质体（liposomegels）的制备 和体外释药特性。作者使用脂质成膜水化的方法制备脂质体，用缓冲液洗涤后加入Ａ冻干保 护剂蔗糖进行冻干，后加入Ａ到具有壳聚糖骨架结构的凝胶中即得，药物的体外释放受脂质 的组成和水化成膜的条件影响，符合 Higuchi 扩散模式。与对照的 5-FU 水凝胶相比有明显 的缓释作用。在制备脂质体时，作者发现由于药物对脂相有一定的亲合力，因此其包封率 随胆固醇量的下降和药物/水相质量比的增加而增加。处方中最高的包封率可达 2μm5.4%左右。 作者并没有探讨该制剂的稳定性，但根据其缓释的特点可以推测脂质体周围的高粘度凝胶 可能对药物的渗透有一定的保护作用。E.Ruel-Gariepy 等（16）也用类似的方法制备了供 体内埋植的温度敏感型凝胶脂质体。作者用逆相蒸发法先将药物制备成大单层脂质体，多 层脂质体则用水化法制的。模型药物 CF 的包封率在 1-8%之间。另制备了壳聚糖和甘油磷 酸（glycerophosphate）的温度敏感性凝胶，发现壳聚糖由于不具备表面活性，不会像其 他亲水凝胶中高分子化合物一样穿透脂质双分子层而导致药物渗漏，电镜观察法相脂质体 在该凝胶中不会发生合并，通过磷脂酶 A2μm 可以证明脂质层的完整性。因此不会对分散在 其中的脂质体的稳定性产生影响。而且作者还认为胆固醇（40mol%）通过与脂质层的相 互作用降低了其通透性，且增加了稳定性，减少的药物的渗漏。 C.Tardi 等（17）采用了高压匀质法使高浓度的磷脂分散，形成了一种半固体凝胶状 物质，其中充满了大量的单层囊泡（S)pHUVs），包裹在这种凝胶状磷脂囊 VPGs（vesicularphospholipidgels）中的亲水性药物具有缓释作用。VPGs 由于在与缓冲 液混合后可变成粒径均一的脂质体，且包封率高。因此作为一种中间体或前体脂质体，尤 其适用于高渗透率且无法稳定保存的药物。作为非胃肠道给药载体，作者还进一步论证了 VPGs 可以用于热压灭菌，这是脂质体制剂无法做到的。同时，在热压灭菌中，由于一些 小囊泡的合并和增大，包入Ａ内相得体积增大，VPG 的包封率反而提高（2μm9%-47%），这 与常规脂质体在加热后药物会渗漏的结果相反。 三，结语 脂质体作为一种新型的药物传递系统正越来越被人们重视，通过自身的性质或对其表 面的修饰可以得到不同的靶相给药或缓控释的目的。对于不同的亲水性药物，如何能有效 地提高其包封率并降低在储存中渗漏，不仅要借鉴先进的技术和辅料。还需要根据制剂设 计要求找出最合适的制备工艺。