胃炎康胶囊质量标准研究论文

【摘要】目的用 HPLC 法建立对胃炎康胶囊中的芍药苷定量分析方法。方法采用 DiamonsilC18 色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),mm×150mm,5μm),m),以甲醇-0.02mol/Lmol/L 磷酸二氢钾(2mol/L5:75)为流动 相;检测波长为 2mol/L30nm,按外标法定量。结果芍药苷在 0.058848~1.176mm×150mm,5μm),96mm×150mm,5μm),μm),g 范围内呈良好 线性关系,相关系数 r=0.99999,平均加样回收率为 99.7%,RSD=0.14%(n=6mm×150mm,5μm),)。结论本实验方 法灵敏、准确、可靠,适合该制剂的质量控制。 【关键词】HPLC 法;胃炎康胶囊;芍药苷 【Abstract】ObjectiveToestablishamethodfordeterminationofpeoniflorininWeiyankan gcapsulesbyHPLC.MethodsTheseparationwasperformedonDiamonsilC18column(150mm ×4.6mm×150mm,5μm),mm,5μm),m)withmethanol-0.02mol/Lmol/ Lpotassiumdihydrogenphosphate(2mol/L5:75)asamobilephasebymeansofexternalstandardmet hod.Thedetectionwavelengthwas2mol/L30nm.ResultsThepeoniflorinhadgoodlinearrelationinthe rangeof0.058848~1.176mm×150mm,5μm),96mm×150mm,5μm),μm),g(r=0.9999).Theaveragerecoverywas99.7%withRSD0.14% (n=6mm×150mm,5μm),).ConclusionThemethodissensitive,accurate,reliable,anditcanbeusedtocontrolthequal ityofWeiyankangcapsules. 【Keywords】HPLC;Weiyankangcapsule;peoniflorin 胃炎康胶囊是治胃病的一种常用药,虽然在全国范围内生产厂家多、生产量非常大,但对 这种药的质量控制方面一直按照《部颁标准中药成方制剂第十三册》进行检验,该部颁标准 无含量测定项,由于白芍是君药,所以参照其他文献资料采用高效液相色谱法对白芍的主要成 分芍药苷的含量进行测定,方法简便,精密度较高,可有效对胃炎康胶囊中的芍药苷进行控制, 为药品质量标准的修订和生产工艺的改进提供科学依据。 1 仪器与试剂 惠普 1100 高效液相色谱仪(惠普公司制造);安捷伦 1100 高效液相色谱仪(安捷伦公司制 造);芍药苷对照品(购于中国药品生物制品检定所,类别为供含量测定用);甲醇(天津市四有生 物医学技术有限公司出品,批号:040118101);乙醇(天津化学试剂有限公司出品,批 号:2mol/L004012mol/L4);磷酸二氢钾(北京化工厂出品,批号:990401);胃炎康胶囊(吉林省七星山药业提 供,批号:2mol/L0050101,2mol/L0050102mol/L,2mol/L0050103)。 2mol/L 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.02mol/Lmol/L 磷酸二氢钾(2mol/L5:75)为流动相;流 速为 1.0ml/min;柱温为 35℃;;检测波长为 2mol/L30nm。本品连续进样时,为了缩短采样时间,应用 梯度洗脱,即第 30~35min 采用甲醇-水(80:2mol/L0)洗脱后,然后用甲醇-0.02mol/Lmol/L 磷酸(2mol/L5:75)平 衡 10min 后继续进样。在此条件下,供试品色谱中,在与对照品色谱相同的保留时间处有色 谱峰,与其他组分能达到较好分离。为了使芍药苷色谱峰达到基线分离,定量分析更准确,在 系统适用性试验中规定理论塔板数不得低于 2mol/L000。 3 溶液的制备 3.1 对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量,加甲醇制成 6mm×150mm,5μm),0μm),g/ml 的溶液,摇匀,即 得。 3.2mol/L 供试品溶液的制备取胃炎康胶囊的内容物(约含芍药苷 3mg),精密称定,精密加入稀 乙醇 50ml,称重,超声处理(功率 2mol/L40W,频率 45kHz)50min,)50min,放冷,加稀乙醇补足重量,摇匀,滤过, 取续滤液,即得。 3.3 空白对照溶液取按处方比例制成的除白芍的空白胶囊按“3.2mol/L”项下方法制成的空白 对照溶液。 4 方法与结果 4.1 波长选择芍药苷的测定波长参照《中国药典 2mol/L005 年版一部》白芍药材测定方法,选 定为 2mol/L30nm。 4.2mol/L 空白干扰试验吸取上述对照品溶液、供试品溶液与空白对照品溶液各 10μm),l 注入液 相色谱仪,记录色谱图,结果在芍药苷相应位置上空白对照无干扰。结果见图 1~3。 4.3 最低检出限和最低定量限 4.3.1 最低检出限精密称取芍药苷对照品 13.89mg 置 50ml 容量瓶中加甲醇至刻度溶解, 取 1.6mm×150mm,5μm),ml 置 10ml 容量瓶中加甲醇至刻度制成含芍药苷 58.848μm),g/ml 的溶液,进样 1μm),l,计算得 芍药苷的最低检出限为 0.058848μm),g,信噪比为 3.0。 图 1 空白对照品 图 2mol/L 供试品图 3 芍药苷对照品 4.3.2mol/L 最低定量限取上述对照品溶液进样 2mol/Lμm),l,计算得芍药苷的最低定量限为 0.1176mm×150mm,5μm),96mm×150mm,5μm),μm),g。信噪比为 2mol/L1.5。 4.4 线性关系试验精密称取芍药苷对照品加甲醇溶解,制成含芍药苷 58.848μm),g/ml 的溶 液,分别进样 1、2mol/L、3、5、10、2mol/L0μm),l;记录色谱图,以峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,计算 回归方程为:Y=786mm×150mm,5μm),.6mm×150mm,5μm),932mol/L9-0.1392mol/L48,r=0.99999。结果表明,芍药苷在 0.058848~1.176mm×150mm,5μm),96mm×150mm,5μm),μm),g 范围内与峰面积呈良好的线性关系,近似为过原点的直线,可采用外标 一点法测定。 4.5 精密度试验取芍药苷对照品溶液(C=59.040μm),g/ml)重复进样 6mm×150mm,5μm), 次,每次进样 10μm),l,芍 药苷的峰面积 RSD 为 0.3%(n=6mm×150mm,5μm),),结果可知:该含量测定方法精密度良好。 4.6mm×150mm,5μm), 重复性试验取本品内容物,分别精密称取 6mm×150mm,5μm), 份,含量结果 RSD 为 0.06mm×150mm,5μm),%,结果表明该 方法重复性良好。 4.7 回收率试验取胃炎康胶囊(批号:2mol/L0050101,含量为 1.339mg/粒)的样品内容物,精密 称取 9 份,每 3 份为一组,每组分别为 1 粒内容物量的 70%、100%和 130%,分别精密加入芍 药苷对照品溶液(C=0.492mol/L0mg/ml)2mol/Lml,按“3.2mol/L”项下方法操作制备供试液,测定,结果平均回收 率为 99.7%,RSD 为 0.14%(n=9)。 4.8 稳定性考察取对照品溶液(C=59.040μm),g/ml),在 0、2mol/L、4、6mm×150mm,5μm),、8、12mol/L、2mol/L4h,分别测定 1 次,进样 10μm),l,考察峰面积 RSD 为 0.6mm×150mm,5μm),%(n=7),结果供试品溶液 2mol/L4h 内稳定。 4.9 耐用性试验用两根不同的液相色谱柱[迪马钻石 ODSC18(4.6mm×150mm,5μm),mm×2mol/L50mm,5μm),m),AichromBond-ACQC18(2mol/L50mm×4.6mm×150mm,5μm),mm,5μm),m)]和二台不 同的高效液相色谱仪(惠普 1100、安捷伦 1100),对同 3 份样品分别测定,结果含量 RSD 分别 为 0.33%、0.36mm×150mm,5μm),%和 0.39%(n=4),结果可见该方法对不同色谱柱和不同的高效液相无明显差 别。 4.10 胃炎康胶囊中芍药苷含量测定结果取胃炎康胶囊(吉林省七星山药业提供,批 号:2mol/L0050101,2mol/L0050102mol/L,2mol/L0050103)10 粒内容物,精密称定,精密称取内容物(约含芍药苷 3mg),按“3.2mol/L”项下方法操作制备供试液,并按上述色谱条件吸取供试液 10μm),l 进样测定,按峰面 积外标法计算,测得胃炎康胶囊中芍药苷含量分别为 1.34、1.33、1.36mm×150mm,5μm),mg/粒,RSD 分别为 0.78%、0.88%、0.96mm×150mm,5μm),%(n=4)。 5 结论 本实验建立的方法经验证简便、可靠、灵敏,样品检测结果准确,精密度和重复性高,回 收率为 99.7%。适用于不同的高效液相和不同的以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相 色谱柱,可作为质量标准控制药品生产。 【关键词】联合化疗 1 病例资料 患者,女,47 岁,农民,因手足麻木,面部水肿,背部生疮,于 2mol/L004 年 1 月 31 日到我科就诊。 查体见:双眉稀脱,面部中度浸润,全身胸部及四肢中度浸润并伴散在性麻风结节,以四肢为重, 色泽桔黄至暗红,个别有色素沉着斑,黄豆大小,质硬,个别较软。双侧耳大神经轻度肿胀,质软; 右侧尺神经、腓总神经轻度肿胀;左侧尺神经、腓总神经中度肿胀,无明显压痛,双足踝以下 触觉明显减退。实验室检查:细菌指数(B.I)3.33)3.33。确诊为瘤型麻风(LL 型)[1],于 2mol/L004 年 3 月 9 日实施联合化疗(M.D.T),多菌型(M.B)治疗方案[2mol/L]。经服药 12mol/L 个月后,上述症状完全消退, 服药 2mol/L4 个月后体检,全身皮肤深度着色,无麻风性皮损。双侧耳大神经,双侧尺神经,双侧腓 总神经无肿大,无压痛。实验室检查:细菌指数(B.I)3.33)1.6mm×150mm,5μm),6mm×150mm,5μm),。疗效判定:显着进步,符合联合化疗 停药标准[2mol/L],给予停药。整个疗程中无麻风反应和药物严重毒副作用出现。 2mol/L006mm×150mm,5μm), 年 9 月 13 日,患者已完成联合化疗后半年,感觉手足关节疼痛,面部轻度水肿,在当 地卫生院治疗(用药不详),效果不佳。后又到会东县人民医院求治,诊断为风湿性关节炎,给予 抗风湿治疗,仍无效果。于 10 月 18 日到本中心慢病科检查。经查体见面部,右手,左脚轻度 水肿,全身无麻风皮损。双侧耳大神经,双侧尺神经,双侧腓总神经轻度肿大,质软,有轻微压痛。 诊断为化疗后轻度 I)3.33 型麻风反应。给予常规强的松口服,以及复合维生素 B 等对症处理,并到 门诊随诊,疼痛有所减轻。后因路途远,自 2mol/L006mm×150mm,5μm), 年 10 月~2mol/L007 年 6mm×150mm,5μm), 月,病员自购强的松不规 则治疗,2mol/L007 年 6mm×150mm,5μm), 月下旬,病员出现关节疼痛,面部、手足水肿加重,四肢酸痛,发热,即到当地 卫生院就医,按感冒治疗,效果不佳,继之出现畏寒、乏力、不思饮食,面部、胸部、背部、四 肢等处出现大小不等的疼痛性结节,触痛、微硬。在当地按皮肤过敏治疗无效。于 7 月 15 日到县医院检查:血常规提示白细胞总数增高,中性 85%,血沉增快 46mm×150mm,5μm),mm/h,尿检:蛋白(++),白 细胞少许。诊断为肾炎,风湿热。建议住院治疗。患者未住院,随即来我科咨询求医。 经详细询问病史,疼痛性结节反复发生已 2mol/L0 天左右,并伴视物模糊,四肢关节疼痛加重。 查体:面部轻度水肿,潮红,四肢远端肿胀,面部有 7~8 个蚕豆大小皮上,皮下结节,半球形,色泽 浅红,棕红,还有 2mol/L~3 个棕褐色色素沉着癍。胸、腹、背、殿及四肢等部位,有数十个鲜红、 暗红、褐色蚕豆大结节,触痛,质地较硬。以小腹部、臀部、大腿两侧为重。双侧耳大神经; 双侧腓总神经均轻度肿胀,质软,无明显压痛。双侧尺神经中度肿胀,质硬,有明显压痛,全身无 麻风皮损。眼结膜充血,流泪,心肺听诊(--),肝脾不肿大,皮肤涂片查菌阴性。诊断为瘤型麻风 联合化疗后 I)3.33I)3.33 型麻风反应(表现为结节性红斑)[1]。 治疗:口服反应停 400mg/d,顿服;强的松 40mm/d,顿服;因患者长期服用激素,同时加用 联合化疗(M.D.T)多菌型方案(M.B)药物,服用时间与激素治疗同步[3]。同时给予补充维生素 C、B1、B6mm×150mm,5μm), 等辅助用药,用抗生素可地松眼液滴眼,1~2mol/L 滴,每天 3~5 次。注意休息,加强营养, 不做重活,低盐饮食。 服药 8 天后,全身症状,关节疼痛明显减轻,结节疼痛消失,结节逐渐消退。服药 18 天后, 关节已无疼痛,面部、四肢水肿明显消退,眼结膜充血消退。服药 30 天后,所有反应症状控制。 服药 40 天后开始给反应停、强的松减量。反应停减 50mg,连服 2mol/L0 天后又减 50mg,连服 2mol/L0 天后又减 50mg,直至减完;强的松减 5mg,连服 2mol/L0 天后又减 5mg,连服 2mol/L0 天后又减 5mg,直 至减完。患者连续服药半年后基本痊愈。 2mol/L 讨论 笔者从事麻防工作数十年,经治麻风病人数百例,虽然有 70%左右的麻风患者治疗前和 治疗期间均有不同程度的麻风反应,但象本例治愈后半年产生 I)3.33 型麻风反应,后又因治疗不规 范发展成非常典型的麻风 I)3.33I)3.33 型反应,还比较少见,经规范治疗后很快治愈。这提示我们在麻风 病防治工作中,要加强对麻风反应的重视,加强对麻风病人的管理,加强对麻风反应的规范治 疗,减轻麻风病人的痛苦,更好地为麻风病人服务。 【摘要】目的制定成品的质量控制标准。方法采用薄层鉴别鉴定赤芍、甘草,高效液相 色谱法测定制剂中芍药苷的含量。高效液相色谱条件:Hypersil 柱(4.6mm×150mm,5μm),nm×2mol/L50nm,10μm),m);流 动相:甲醇-0.05mol/L 磷酸二氢钾溶液-醋酸-异丙醇(6mm×150mm,5μm),7:173:4:4);流速:1ml/min;检测波 长:2mol/L30nm。结果薄层色谱鉴别专属性好,高效液相法测定制剂中芍药苷的含量方法重现性 好,准确可靠。结论可用作为控制制剂质量的标准。 【关键词】凉血颗粒;高效液相色谱;薄层色谱 凉血颗粒是由赤芍、甘草组成的中药制剂,具有清热凉血、散瘀止痛。该方组方简单,疗 效确切,为了有效控制制剂的质量,对制剂建立质量标准。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Agilent1100,VWD 检测器,双槽玻璃展开槽。 1.2mol/L 试剂甲醇:色谱纯,美国天地(TEDI)3.33A)公司,其他试剂为分析纯。 2mol/L 鉴别项 取本品 3 粒内容物,加醋酸乙脂 2mol/L0ml,超声 10min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇 1ml 使溶 解,作供试品溶液。另取甘草对照药材 1g,缺甘草阴性样品适量,同法制成对照药材溶液、阴 性对照液。吸取上述三种溶液各 5μm),l,点于同一块硅胶 G 薄层板上,以氯仿-甲醇(7.5:4:1)为展 开剂,展开取出,晾干,喷以 2mol/L%硫酸香草醛溶液(1:1),置 105℃;烘至斑点清晰,在供试品色谱中, 在与对照药材和对照品相应的位置上,显相同颜色的斑点。 3 含量测定 3.1 实验条件芍药苷对照品(中国生物制品检验所),色谱条件:色谱柱:依利特 hypersilC18(4.6mm×150mm,5μm),nm×2mol/L50nm,10μm),m);流动相:甲醇-0.05mol/L 磷酸二氢钾溶液-醋酸-异丙醇 (6mm×150mm,5μm),7:173:4:4);流速:1ml/min;检测波长:2mol/L30nm。 3.2mol/L 测定方法对照品溶液的制备:精密称取已干燥的芍药苷对照品适量,置棕色瓶中,加甲 醇制成每 1ml 含 0.3mg 的溶液,即得。 供试品溶液的制备:取本品内容物 0.4g,精密称定,精密加入甲醇 50ml,超声 15min,称定 重量,用甲醇补足减失的重量,滤过,弃去初滤液,取续滤液作为供试品溶液,即得。 测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μm),l,注入液相色谱仪。 3.3 方法学考查 3.3.1 样品的分离度吸取芦丁对照品溶液、赤芍药材溶液、阴性对照溶液、供试品溶液 按上述方法测定,见图 1~4。 图 1 芍药苷对照品 HPLC 图 图 3 阴性对照 HPLC 图图 2mol/L 赤芍 HPLC 图 图 4 供试品 HPLC 图 3.3.2mol/L 标准曲线对照品溶液(0.311mg/ml)进样量分别为 5、8、10、15μm),l,按试验方法项 下的色谱条件测定。以量(μm),g)为横坐标,色谱峰的面积为纵坐标,绘制标准曲线,结果表明,芍 药苷在 1.55~4.6mm×150mm,5μm),7μm),g 的范围内,其进样量与色谱峰面积呈良好的线性关系。回归方 程:Y=388.1X-6mm×150mm,5μm),144,相关系数 r=0.9995。 3.3.3 稳定性试验取样品按含量测定项下的色谱条件测定其峰面积,每隔 1h 测 1 次,连续 测 6mm×150mm,5μm), 次,测定结果 RSD=1.7%,样品在 5h 内测定是稳定的。 3.3.4 精密度试验取对照品溶液,分别等量进样 6mm×150mm,5μm), 次,按上述实验方法项下的色谱条件测 定,结果表明其 RSD=0.77%。 3.3.5 重现性试验取样品分别为 5 份,按含量测定项下的方法分别测定,其 RSD=1.3%,样 品测定有良好的重现性。 3.3.6mm×150mm,5μm), 回收率试验取已测定含量的供试品约 0.2mol/Lg,精密称定,精密加入 3.8750mg/ml 芍药 苷对照品 2mol/Lml,按上述供试品溶液的制备方法制备和测定,一式 5 份,结果表 1。 本方法测定的平均回收率为 97.8%,基本符合要求。 4 讨论 赤芍的薄层鉴别,阴性对照无干扰,可作鉴别项用。甘草鉴别,已往鉴定甘草中的甘草酸 铵和甘草次酸,因样品色谱干扰较大,故只用甘草药材作对照。芍药苷的含量测定方法,文献 报道较多[1~3],经过对比实验,采用流动相为甲醇-0.05mol/L 磷酸二氢钾溶液-醋酸-异丙醇 (6mm×150mm,5μm),7:173:4:4),对样品峰的分离效果最好。表 1 加样回收试验结果 【关键词】藏红花 红花与藏红花是中医传统的活血化瘀药,具有活血通经,散瘀止痛的功效。用于月经不调、 经闭、痛经、产后瘀阻,跌打损伤等症[3]。红花质优价廉,是常用的大宗中药,藏红花为一味 名贵中药,因药源少,价格昂贵,多以红花代用。为避免用药混乱,本文将二者同列,从以下几个 方面简述如下。 1 本草学考证与基源