中药复方化学成分研究论文

摘要:综述了中药复方化学成分的研究成果与进展，包括有效化学成分的定性与定量、 全方化学成分的提取分离与鉴定、复方活性部位与有效成分的药理追踪等。 中药复方是中医治病的主要临床应用形式，复方中的化学成分是中药发挥药效作用的 物质基础。进行复方化学成分的研究，在阐明中医的方药理论，揭示中药的配伍规律和作 用机制，优化制剂工艺，制定质控标准，实现中医药现代化并走向国际市场等方面均具重 要意义。笔者就中药复方化学成分的研究进行综述，以供参考。 1 研究方法与途径 迄今，中药复方化学成分的研究，无论在思路还是在技术与方法等诸方面仍处探索阶 段，不少作者提出了一些有意义的观点和构思，如余亚纲的中药复方化学成分系统分离与 鉴定的三元设计方案〔1〕，薛燕等提出的中药复方多成分经多途径协同作用的霰弹理论 〔2〕以及周俊的中药复方天然组合化学库与多靶作用机制〔3〕等，这些对于如何开展中 药复方化学成分的研究工作具有一定的启发和参考价值。关于中药复方化学成分的研究方 法与途径，目前可归纳成如下 3 个方面：1)以单味药有效成分为指标，对全方制剂进行定 性与定量。2)采用植化方法对全方化学成分进行系统提取、分离和鉴定。3)以药效为标准 追踪复方活性部位与有效成分。 2 以单味药有效成分为指标定性与定量 确定单味药主要有效化学成分作为指标性物质(markersubstances)markersubstances)，采用各种分离与 分析技术，对复方全方、各药配伍及各单味药制剂中指标性物质(markersubstances)成分)进行定性与定量， 并探讨制备条件(markersubstances)药材粒度、煎煮器具、加水量、浸泡时间、煎煮时间、煎煮次数、加热温 度、包煎与另煎以及先煎与后下等)、制备方式(markersubstances)单煎、分煎和合煎)、配伍和剂型等对指标 性物质(markersubstances)成分)质和量的影响。此类研究工作开展较多，也取得了一些有意义的结果。 四物汤由当归、地黄、芍药和川芎组成，袁久荣等〔4〕采用多种分析方法测定了四 物汤各药单煎、分煎和合煎液中的阿魏酸、8 种微量元素、17 种氨基酸及水溶性煎出物的 含量，结果表明在加热条件下合煎时，各成分间具有增溶效应。钟立贤等〔5〕测定并比 较了小青龙汤(markersubstances)由麻黄、桂枝、芍药和甘草等组成)各药单煎、分煎及合煎液中麻黄碱的含 量，结果显示合煎液中麻黄碱含量最低，此系甘草酸与麻黄碱作用产生沉淀所致，但合煎 液与分煎液的药效并无显著差异，说明虽然甘草酸与麻黄碱形成沉淀，但口服后在体内仍 具药效，因此对中药复方煎煮过程中产生的沉淀应慎重考虑其取舍。四逆汤由附子、甘草 和干姜组成，张宇等〔6〕对附子与甘草、附子与干姜及三味药配伍前后主要有效成分进 行了定性与定量，结果表明附子与干姜配伍时，具毒性的乌头碱类含量升高；而附子与甘 草配伍时，乌头碱类含量降低，说明中医“附子无干姜不热、得甘草则缓”理论具有一定科”理论具有一定科 学依据。 六味地黄汤为补阴名方，严永清等〔7～9〕对其化学成分进行了初步分析，结果表明 同一方剂因制备工艺不同，其化学成分的质与量也不尽一致；复方化学成分不等于各单味 药化学成分的简单加和；合煎液中化学成分种类多于分煎液。朱永新等〔10〕发现生脉散 水煎剂中人参皂苷 Rg3 和 Rh1 等含量明显高于单味人参水煎剂，由此推测在加热煎煮过程 中发生了人参皂苷的水解转化，结果使原来在单味药中属微量成分的 Rg3 和 Rh1 在复方中 成为主要成分。严永清等〔7〕则在比较生脉散中人参、麦冬和五味子合煎与分煎液化学 成分差异时发现，合煎液中人参总皂苷的含量低于分煎液，而在血流动力学以及对心肌作 用和临床疗效观察上，合煎液效果优于分煎液，据此推测人参皂苷 Rg3 和 Rh1 等可能是该 方某些药理作用和临床疗效的活性成分。魏慧芬等〔11〕对小半夏加茯苓汤及方中各单味 药的化学成分进行了比较，结果发现复方中生物碱含量低于半夏单味药，而氨基酸含量均 高于各单味药，认为高含量的氨基酸对发挥该方的和胃止呕作用有益。 五仁液系山楂核等多种中药提取制成的一种杀菌剂，涂家生等〔12〕用 GC/MS 法对 其化学成分进行了分析，发现其富含酚类、苯甲酸类和脂肪酸等具抗微生物作用的有效成 分，并以面积归一化法计算了各类有效成分的相对含量。枳术丸由枳实和白术组成，罗尚 凤等〔13〕采用 GC/MS 法测定了其制备过程中苍术酮、苍术内酯、羟基苍术内酯和脱水 羟基苍术内酯等 4 种有效成分的含量动态变化，结果发现在炮制时白术中的苍术酮可氧化 生成苍术内酯和羟基苍术内酯，而在与枳实组方时苍术内酯和羟基苍术内酯又可还原成苍 术酮，并讨论了这一化学变化的原因。 3 用植化法对化学成分提取、分离与鉴定 将中药复方视为一个整体，采用植化方法对全方化学成分进行系统提取、分离、纯化 和结构鉴定，可全面分析复方化学成分是什么，与单味药成分比较有何区别以及有无新化 合物生成等。目前，有关这方面的研究工作报道不多。 王燕生等〔14〕将四君子汤和单味白术的水煎剂分别进行了提取分离，从中均分得苍 术醚、苍术内酯、羟基苍术内酯和脱水苍术内酯等 4 种化合物，证明四君子汤中白术的主 要化学成分没有变化，可作为该方的质控指标性成分。脉络宁注射液系石斛、金银花等提 取加工而成的复方制剂，朱蓉贞等〔15〕从该制剂中分得了泽兰内酯和滨蒿内酯 2 个香豆 素类化合物，均属单味药石斛中的化学成分。谭洪根等〔16〕对芍药甘草汤的化学成分进 行了系统研究，共得到苯甲酸、甘草苷、芍药苷和甘草酸等 11 个化合物，上述成分与单味 药芍药和甘草所含化学成分基本一致。夏云等〔17～19〕对生脉散的化学成分进行了研究， 在其水煎剂中发现并分离鉴定了在煎煮过程中由复方产生的新成分 5-羟甲基-2-糠醛(markersubstances)5HMF))，并探讨了复方化学成分动态变化与药效之间的关系。 4 以药效为标准追踪活性部位与有效成分 根据临床疗效，建立与某一病症相对应的药理模型，确定一种或多种药效作用的观测 与评判指标，然后对全方及其各种提取分离部位进行活性追踪，探讨复方产生某种药理作 用的有效部位、有效组分或有效化学成分，并分析其质和量的变化与药效的关系，在一定 程度上阐明复方组方的配伍规则及治病作用机制。此项工作难度大、涉及面广，目前尚处 起步和探索阶段。 7118 蛇药系柑子叶和蛇王藤等组成的复方制剂，严克东等〔20，21〕选择眼镜蛇毒 中毒小鼠的保护作用为药理筛选模型，对该制剂进行了提取分离和活性追踪，结果表明有 效部位极性大、易溶于水，主要成分为有机酸，且以盐的形式显示其药效。马郁琪等 〔22〕在研究由柚子叶和双目灵两药组方的广东蛇药化学成分时，同样发现其水溶性部位 有效，主要有效成分为有机酸钾钠盐。此外，黄酮类和糖类对抗蛇毒效果具有协同作用 〔23〕。排脓散由枳实、芍药和桔梗等组成，文献报道〔24〕对其进行了提取分离和活性 追踪实验，结果提示排脓散对角叉菜胶所致水肿形成的抑制作用，系枳实中的柑桔苷、新 陈皮苷和芍药中的芍药苷等有效成分协同作用的结果。 二妙散由黄柏和苍术两药等量而成，陈婷等〔25〕以 2，4，6-三硝基氯苯(markersubstances)PC)所致小 鼠迟发性变态反应(markersubstances)PC-DTH)为指标，对二妙散水煎剂进行了提取分离，通过对其有效部位 进行定性分析，发现生物碱类组分是其免疫抑制作用的主要活性成分，而醇沉部位虽不含 生物碱，但也具明显免疫抑制活性，提示生物碱类并非免疫抑制的唯一成分。黄连解毒汤 由黄连、黄芩和栀子组成，邵兰等〔26〕分别用全方水煎剂，石油醚、氯仿和正丁醇提取 物以及上述溶剂提取后的水溶物进行小鼠益智作用的药理研究，发现其有效成分主要分布 在水溶性部位，为进一步研究提供了依据。六味地黄汤对免疫功能具有明显调节作用，聂 伟等〔27〕以环磷酰胺处理小鼠为药理模型，抗体生成反应为活性评价指标，定向追踪分 离了六味地黄汤发挥免疫调节作用的活性成分，结果提示其主要药效部位是醇沉部分，主 要活性成分为酸性多糖，其相对分子量在 5000～40000 之间。 5 结语 进行中药复方化学成分的研究，应从整体、系统观点出发，根据临床疗效选择较合适 的研究对象，建立与某种病症相对应的量化药理模型，确定一种或多种药效观测指标及其 活性评价标准，采用植化方法进行合理的提取和分离，紧密结合药理实验研究中药复方有 效化学成分的效、质、量、径及其相互关系。在思路上，应将中医中药传统理论与现代科 学技术相结合，变模糊判断为量化评价，并有创新和突破；在实验设计上，应将体内与体 外结合，有机成分与无机成分结合，静态与动态分析结合；在研究方法上，尽可能采用先 进技术如 LC-MS、CE-MS、LC-NMR 及 LC-MS-MS 等方法，并开展可量化的、与中医药 理论相对应的药理模型的研究，将工作不断深入并更趋合理和科学，最终阐明中医药治疗 疾病的配伍规则和作用机制。 摘要:综述了药用卷柏在化学成分、药理作用方面的研究概况，提示丰富的卷柏资源有 进行深入研究的意义。 卷柏为蕨类植物门卷柏科卷柏属植物，约有 700 种，广泛分布于全世界。我国约有 50 种，产于全国各地［1］。常作为药用的有 6 种，被《中华人民共和国药典》一九九五年版 中收载的两种为卷柏科植物卷柏 Selaginellatamariscina(markersubstances)Beauv.)Spring;垫状卷柏 S.pulvinata(markersubstances)Hook.etGrev.)Maxim.，具有活血通经之功效，用于经闭痛经，症瘕痞块，跌 扑损伤；炒炭后可化瘀止血，用于吐血、崩漏、便血、脱肛。我国南方部分地区广泛使用 的石上柏，《广西中药材标准》中收载石上柏的来源为卷柏科植物深绿卷柏 S.doederleiniiHieron.(markersubstances)别名：大叶菜)；江南卷柏[WTBXWTBX〗S.moellendorfiiHieron.(markersubstances)别名：地 柏枝)，具有清热解毒、抗癌、止血之功效，用于癌症、肺炎、急性扁桃体炎、眼结膜炎和 乳腺炎。《贵州民间药物》中将深绿卷柏称为多德卷柏 S.doederleiniiHieron.，具有祛风、 散寒、消肿、止咳之功效，用于风湿病，风寒咳嗽。山东省有些地区使用中华卷柏 S.sinensis[WTBXWTBZ〗(markersubstances)Desv.)Spring,用于治疗慢性气管炎。福建等地使用的为衮州卷柏 S.involvens(markersubstances)Sw)Spring。 为进一步深入研究卷柏的药用价值，现将对卷柏的化学成分、药理作用的研究情况做 简要综述。 1 化学成分 1.1 黄酮类：现已发现卷柏中含有芹菜素(markersubstances)apigenin)、穗花杉双黄酮(markersubstances)amentoflavone)、 扁柏双黄酮(markersubstances)hinokiflavone)和异柳杉素(markersubstances)isocryptomerin)［2］及阿曼托黄素(markersubstances)amentoflavone) ［3］。林瑞超［4］等从深绿卷柏中分离得到阿曼托黄素、7，7″-二-O-甲基阿曼托黄素、 7，4′，7″，4″-四-O-甲基阿曼托黄素和三叶胶树黄酮。陈平［5］等从深绿卷柏中分离出芹 菜素。 1.2 生物碱类：林瑞超［6］等从深绿卷柏中分离得到 3 种新的生物碱苷 (markersubstances)alkaloidglycoside):hordenine-Ο-α-1-rhamnopyranoside,n-methyltyramine-O-α-1rhamnopyranoside,hordenine-O-［(markersubstances)6″-O-trans-cinnamoyl)-4′-O-β-d-glucopyra-nosyl-α-1rhamnopyranoside。 1.3 酚类：林瑞超［4］等从深绿卷柏中分离得到 5 种木脂素：(markersubstances)-)-里立脂素 A、(markersubstances)-)-里 立脂素 B、(markersubstances)+)-荛花醇、(markersubstances)-)-去甲络石苷和(markersubstances)+)-罗汉松脂素；2 种苯丙酮：3-羟-1-(markersubstances)3-甲氧-4羟苯基)-丙酮和 3-羟-1-(markersubstances)3，5-二甲氧-4-羟苯基)-丙酮；卷柏［2］中也含有酚性成分，具体 成分不详。 1.4 有机酸类：陈德钊［7］等从江南卷柏中分得棕榈酸、硬脂酸；巫忠德［8］等从 深绿卷柏中分离得到莽草酸，陈平［5］等分离得到大叶菜酸和硬脂酸(markersubstances)stearicacid)。 1.5 其它：卷柏［2］中含有氨基酸以及海藻糖等多糖类成分；从江南卷柏［7］的氯 仿提取物中分离得到异茴芹素(markersubstances)isopimpinellin)、β-谷甾醇及少量二萜内酯；深绿卷柏［9］ 的脂溶性成分中含有：十四烷酸乙酯、7，10，14-三甲基十五烷酮-2、十五烷酸乙酯、十 六烷酸甲酯、十六烷酸乙酯、十六烷酸异丙酯，9-十八碳烯酸(markersubstances)Z)乙酯、15-甲基-十七烷酸 乙酯；并含有 β-谷甾醇和异茴芹素(markersubstances)isopimpinellin)［5］。 2 药理作用 2.1 免疫及抗肿瘤作用：卷柏［10］全草的热水提取物和乙醇提取物，用总细胞容积 法测定，对小鼠肉瘤 S180 有较强的抑制作用，体内实验结果，对小鼠艾氏腹水癌也有一 定的抑制作用，并能延长移植肿瘤动物的寿命。从卷柏［3］中提取的阿曼托黄素对磷脂 酶 C 有抑制作用，而磷脂酶 C 是磷酸肌醇转换退速酶，在一些肿瘤中磷酸肌醇的转换活性 都有所增强，因此磷酸肌醇抑制剂将是研究细胞内信息传递和治疗肿瘤的有效工具。小菅 卓夫等［11］用石上柏的乙醇提取物在体内、体外试验中对小鼠艾氏腹水瘤均有抑制作用， 体外试验的抑制率为 75%以上。黄才等［12］报道：石上柏的乙醇提取物对蛋白激酶 C 有 强烈的抑制作用，蛋白激酶 C 在细胞跨膜信号传递中起着重要作用，它与细胞增殖有关， 许多蛋白激酶 C 抑制剂对细胞增殖有抑制作用，而一些抗癌药本身就是蛋白激酶 C 的抑制 剂。因此蛋白激酶 C 抑制剂可能是开发和研制抗癌药物的有效途径。Katsuhiko［13］报 道：深绿卷柏水提物对脱氧核糖核酸聚合物 α、β、γ 和逆转录酶有不同的抑制作用。张晓 莉等［14］报道：卷柏与木贼组方制成的注射液对小鼠脾细胞 PF)C、T 淋巴细胞转化的实 验，证明该注射剂具有明显促进小鼠 MΦ 的吞噬功能，提高 T 淋巴细胞转换率。MΦ 不但 参与机体的非特异性免疫，而且在机体的特异性免疫方面也起着重要作用。MΦ 可分泌细 胞因子作用于 TH 及 B 细胞，使之活化、增殖，从而提高机体抗体产生水平。活化的 T 淋 巴细胞是机体抗病毒、抗肿瘤的主要成员，同时它又能分泌多种细胞因子参与机体的免疫 调节。林培英等［15］报道：江南卷柏能降低小鼠血清 IgG 的含量，抑制小鼠特异性抗鸡 红细胞抗体 IgM 和 IgG 溶血素抗体生成；能显著升高血清补体 C3 的含量，但能降低循环 免疫复合物的含量。 2.2 对血液系统的作用：晁志［16］等用卷柏提取液小鼠灌胃给药，以毛细玻璃管法 测定凝血时间，以小鼠剪尾法测定出血时间，结果卷柏和垫状卷柏及其它们的炮制品均能 显著地缩短出血时间，其水溶性部分效果最佳，并证明生品比炒炭后的炮制品效果好。郑 爱光等［17］报道：以兖州卷柏水提取液制成的注射液能明显缩短小鼠和家兔的凝血时间； 通过给药前后家兔自身对比可明显缩短凝血酶元时间。另据报道［18］，以江南卷柏为原 料制成的江南卷柏片能明显缩短小鼠断尾的出血时间，升高兔血小板数，并且具有随剂量 增加、作用增强的趋势。对小鼠 60Co 照射后血小板有保护作用，在体内外均能促进血小 板的聚集。 2.3 抑菌与抗炎作用：陈国佩等［19］用卷柏及其炮制品卷柏炭做了抑菌实验，结果 仅对绿脓杆菌有抑制作用。姜波等［20］报道：采用卷柏熏的方法进行抑菌实验，结果卷 柏烟熏法对感冒杆菌、奈氏菌有抑制作用，时间越长效果越佳，与空白对照组比较，P＜ 0.01。许桢灿［21］等报道：复方兖州卷柏煎剂具有一定的抑菌作用，并通过观察足掌注 射蛋清前后肿胀变化实验证明，复方卷柏煎剂有一定的抗炎作用，与对照组间存在着非常 显著差异。 2.4 镇痛镇静作用：陈美琳［22，23］等报道：卷柏与木贼组方制成的注射剂用小鼠 热板法及扭体法测定，有较明显的镇痛作用，而且毒性小，无成瘾性，镇痛作用特点为起 效慢，持续时间长。在试验过程中发现该制剂对小鼠、鸽、家兔等动物有明显的镇静作用， 并对戊巴比妥有协同作用；明显延长家兔的睡眠时间；也能对抗中枢兴奋药安钠咖的中枢 兴奋作用；对动物的士的宁惊厥均有良好的保护作用。 2.5 其它作用：毛金军等［24］报道：卷柏水提取液对正常离体兔肠平滑肌的蠕动及 张力有明显抑制作用，对氯化钡和乙酰胆碱增强的肠肌张力也有对抗作用。马峰峻等 ［25］报道：该注射剂给犬静脉注射可使动脉收缩压、舒张压和平均动脉压降低，降压效 应在给药后 1min 之内略微上升，而在 23min 出现降压效应，至 10min 降压最多，15min 开始恢复，至 30min 基本恢复到给药前水平。 3 讨论 药用卷柏均为多年生草本植物，全国多数省份均产，春秋两季均可采集，药源丰富。 虽为同科同属植物，但在化学成分、功能主治等方面不尽相同，尤其从临床应用上，石上 柏具有抗癌作用，而其它几种均未见抗癌药效的报道；江南卷柏的临床应用和药理作用显 示有良好的止血效果，而药材石上柏的原植物来源为深绿卷柏和江南卷柏，这在临床使用 上有差异。鉴于药用卷柏丰富的资源，有必要做进一步的更深入的研究。