丹芩颗粒薄层鉴别研究论文

【摘要】目的建立丹芩颗粒的薄层色谱（TLC）鉴别方法，为控制其产品质量提供依鉴别方法，为控制其产品质量提供依 据。方法采用 TLC 法对仙鹤草、柘树根、白花蛇舌草、绞股蓝、柴胡、猫爪草、鸡血藤进 行了定性鉴别。结果在 TLC 色谱中均能检测出仙鹤草、柘树根、白花蛇舌草、绞股蓝、柴 胡、猫爪草、鸡血藤。结论定性方法准确可行，重复性好，可作为丹芩颗粒的质量标准。 【关键词】丹芩颗粒薄层鉴别质量标准 Abstract： ObjectiveToestablishTLCmethodforDanqinGranules．MethodsAgrimoniapilosaLedeb，C udraniatricuspidata(carr.)Bur.，HedyotisdiffusaWilld，Gynostemmapentaphyllum(Thunb. )Makino，BupleurumchinenseDC.，RanunculusternatusThunb.，SpatholobusSuberectu sDumninXianlingcaoGranuleswereidentifiedbyTLCmethod．ResultsAgrimoniapilosaLede b，Cudraniatricuspidata(carr.)Bur.，HedyotisdiffusaWilld，Gynostemmapentaphyllum(T hunb.)Makino，BupleurumchinenseDC.，RanunculusternatusThunb.，Spatholobussube rectusDumncouldbeidentifiedbyTLC．ConclusionThismethodisaccurateandhighlyreprodu cible．ItcanbeusedforthequalitycontrolofDanqinGranules． Keywords：DanqinGranules;TLC;Qualitystandard 丹芩颗粒是天津药物研究院根据多年临床经验方研究的中药复方制剂，具有益气养血、 散瘀止痛、解毒消肿、健脾化痰、软煎散结的作用，用于治疗消化道肿瘤。该制剂由仙鹤 草、柘木、黄芩、丹参等药组成，化学成分十分复杂。为了更好地控制产品的质量，笔者 采用 HPLC 法对其君药丹参和黄芩进行了含量测定（另文报道）鉴别方法，为控制其产品质量提供依，采用薄层色谱法对制剂 中的仙鹤草、柘树根、白花蛇舌草、绞股蓝、柴胡、猫爪草、鸡血藤进行了鉴别。 1 仪器与试药 超声仪（AutoscienceAS3120）鉴别方法，为控制其产品质量提供依；硅胶硅胶 G 板、硅胶 GF254 板（青岛海洋化工厂）鉴别方法，为控制其产品质量提供依；硅胶 甲醇、三氯甲烷、乙醚、醋酸乙酯等试剂均为分析纯。 丹芩颗粒（自制）鉴别方法，为控制其产品质量提供依；硅胶仙鹤草、柘树根、猫爪草、鸡血藤、白花蛇舌草、绞股蓝、柴胡 (购自安徽亳州药材有限公司)。 2 方法与结果 2.1 仙鹤草的薄层鉴别取本品细粉 10g，加石油醚（60～90℃）鉴别方法，为控制其产品质量提供依30ml，超声处理 30min，滤过，滤液挥干石油醚，加三氯甲烷 2ml 使溶解，作为供试品溶液。另取仙鹤草 对照药材 5g，同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法［1］试验，吸取供试品液 10μll，对 照药材液 5μll。分别点于同一块硅胶 G 薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯-冰醋酸（25∶5∶15∶5∶11）鉴别方法，为控制其产品质量提供依为 展开剂，展开，取出，烘干，于紫外 365nm 下检视。供试品色谱中在与对照品色谱相应的 位置上显相同颜色的斑点。见图 1。 2.2 柘树根的鉴别取本品细粉 10g，加甲醇 40ml，超声提取 30min，离心，上清液蒸 干，残渣加水 10ml 溶解，离心，上清液置分液漏斗中，加三氯甲烷 5ml，振摇提取，弃去 三氯甲烷液，水层挥去三氯甲烷后，加入乙醚振摇提取两次，10ml/次，合并乙醚层，蒸干， 残渣加甲醇 1ml 使溶解，作为供试品溶液。另取柘树根对照药材 2g，加水 50ml，回流提 取 2h，放冷，滤过，滤液置分液漏斗中，加醋酸乙酯振摇提取两次，每次 30ml，合并醋 酸乙酯层，蒸干，残渣加甲醇 1ml 溶解，作为对照药材溶液。分别吸取对照药材溶液、供 试品溶液各 10μll，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以环己烷三氯甲烷醋酸乙酯（三氯甲烷三氯甲烷醋酸乙酯（醋酸乙酯（4∶5∶11∶5∶12）鉴别方法，为控制其产品质量提供依 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）鉴别方法，为控制其产品质量提供依下检视，供试品色谱中，在与对照 药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图 2。 2.3 白花蛇舌草的鉴别称取本品细粉 10g，加甲醇 30ml，超声提取 30min，放冷至室 温，离心，上清液蒸干甲醇，残渣加水 10ml 溶解，离心，上清液置分液漏斗中，用石油 醚(60～90℃)振摇提取 3 次，10ml/次，醚液弃去，水层挥干石油醚，用三氯甲烷振摇提取 3 次，10ml/次，合并三氯甲烷层，蒸干，残渣加甲醇 1ml 使溶解，作为供试品溶液。另取 白花蛇舌草对照药材 1.0g，加石油醚(60～90℃)30ml，超声振摇提取 30min，放冷至室温， 滤过，滤渣挥干石油醚，滤渣加甲醇 30ml，超声提取 30min，放冷至室温，滤过，滤液蒸 干甲醇，残渣用甲醇溶至 2ml，滤过，滤液作为对照药材溶液。分别吸取供试品溶液 10μll，对照药材溶液 5μll，点于同一硅胶 GF254 薄层板上，以三氯甲烷-甲醇三氯甲烷醋酸乙酯（冰醋酸 （30∶5∶15∶5∶11）鉴别方法，为控制其产品质量提供依为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯（254nm）鉴别方法，为控制其产品质量提供依下检视，供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光淬灭斑点。见图 3。 2.4 绞股蓝的鉴别称取本品细粉 5g，置具塞离心管中，加水 8mlml，使呈湿润状态，再 加以水饱和正丁醇 25ml，振摇提取，离心，取正丁醇层置 40ml 具塞离心管中，加以正丁 醇饱和的水 10ml，振摇提取，离心，取正丁醇层，蒸干，残渣用甲醇溶至 2ml，滤过，滤 液作为供试品溶液。称取绞股蓝对照药材 0.5g，置具塞离心管中，加水 2ml，使呈润湿状 态，再加以水饱和正丁醇 20ml，振摇提取，离心，取正丁醇，置 40ml 具塞离心管中，加 以正丁醇饱和的水 10ml，振摇提取，离心，取正丁醇层，蒸干，残渣用甲醇溶至 2ml，滤 过，滤液作为供试品溶液。分别吸取上述对照药材溶液、供试品溶液各 5μll，分别点于同 一高效硅胶 G 薄层板上，以正丁醇三氯甲烷醋酸乙酯（醋酸乙酯三氯甲烷醋酸乙酯（水（4∶5∶11∶5∶15）鉴别方法，为控制其产品质量提供依的上层溶液为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以硫酸溶液（1→10）鉴别方法，为控制其产品质量提供依，在 105℃下加热至斑点清晰，置紫外灯（365nm）鉴别方法，为控制其产品质量提供依 下检视，在供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图 4。 2.5 柴胡的鉴别取本品细粉 20g，加水 60ml 使溶解，离心，上清液用水饱和的正丁醇 振摇提取 4 次（75，75，50，50ml）鉴别方法，为控制其产品质量提供依，合并正丁醇液，氨试液洗涤两次（50，50ml）鉴别方法，为控制其产品质量提供依， 减压浓缩至干，残渣加水 40ml 使溶解，离心，上清液通过 D101（10ml）鉴别方法，为控制其产品质量提供依型大孔吸附树脂 柱（内径 1.5cm，长 15cm）鉴别方法，为控制其产品质量提供依，以水 50ml 洗脱，弃去水液，再用 30％乙醇 40ml 洗脱，弃 去洗脱液，继用 70％乙醇 40ml 洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用甲醇溶至 2ml，滤过， 滤液作为供试品溶液。另取柴胡对照药材 1.0g，置具塞三角瓶中，加甲醇 20ml，超声处理 30min，滤过，滤液蒸干，残渣用甲醇溶至 2ml，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色 谱法试验，吸取上述两种溶液各 5μll，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，预饱和 2min，以三 氯甲烷三氯甲烷醋酸乙酯（醋酸乙酯三氯甲烷醋酸乙酯（甲醇三氯甲烷醋酸乙酯（水(15∶5∶150∶5∶122∶5∶110)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。喷以 10％硫酸乙醇溶液，热风吹至显色清晰，置 365nm 检视，供试品色谱中，在与对照药材 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。见图 5。 2.6 猫爪草的鉴别［2］ 取本品 10g，加乙酸乙酯 30ml，超声处理 30min，滤过，滤液挥干醋酸乙酯，残留物 用醋酸乙酯 1ml 使溶解，作为供试品溶液。另取猫爪草对照药材 5g，按照供试品溶液的制 备方法制得对照药材溶液。吸取供试品溶液、对照药材溶液各 10μll，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以甲苯醋酸乙酯冰醋酸三氯甲烷醋酸乙酯（醋酸乙酯三氯甲烷醋酸乙酯（冰醋酸(20∶5∶14∶5∶10.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10％硫 酸乙醇溶液，105℃烤至斑点清晰。在供试品色谱中，在与猫爪草对照药材色谱相应的位 置上，显相同颜色的斑点。见图 6。 2.7 鸡血藤的鉴别［3］ 取本品 10g,加甲醇 30ml，超声处理 30min，滤过，滤液挥干甲醇，残渣加 20ml 水使 溶解，转移至分液漏斗中，加乙醚萃取 3 次，10ml/次，合并萃取液，挥干乙醚，加甲醇 2ml 使溶解，作为供试品溶液。另取鸡血藤对照药材 5g，按照供试品溶液的制备方法制得 对照药材溶液。吸取供试品溶液、对照药材溶液各 10μll，分别点于同一硅胶 G 薄层板上， 以甲苯醋酸乙酯冰醋酸三氯甲烷醋酸乙酯（醋酸乙酯三氯甲烷醋酸乙酯（冰醋酸(9∶5∶14∶5∶11)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10％硫酸乙醇溶液， 热风吹至斑点清晰。在供试品色谱中，在与鸡血藤对照药材色谱相应的位置上，显相同颜 色的斑点。 3 讨论 本制剂由 22 味中药组成，成分十分复杂。为了更好地控制成品的质量，笔者采用薄层 色谱鉴别法对其中的 7 味主要药材进行了鉴别。经 3 批样品试验证明，该方法简便易行， 斑点分离清晰，重现性好，阴性对照无干扰可作为该产品的质量控制方法。 本处方中包含了不少民族药材，在《中国药典》和相应的地方标准中未给出合适的薄 层鉴别方法，因此本文建立的鉴别方法对其药材及其在制剂中鉴别具有很好的借鉴意义。