脑灵片对青木香减毒作用论文

【摘要】目的本试验通过研究脑灵片对青木香中马兜铃酸 A 含量的影响,以初步探讨青 木香的解毒问题。方法青木香与脑灵片共煎后用 RP-HPLC 法测定马兜铃酸 A 的吸收值,观 测其含量的变化情况。结果加入脑灵片后,青木香中马兜铃酸 A 的含量明显降低。结论脑灵 片可显着降低青木香中马兜铃酸 A 的含量。 【关键词】脑灵片青木香马兜铃酸 A 减毒 【Abstract】ObjectiveTostudytheeffectsofNaolingtabletonAristolochiaacidA frominAristolochiadebilis,preliminarystudyonreducingpoisoneffectsofNaolingta blettoAristolochiadebilis.MethodsDeterminedabsorptionofAristolochhiaaicdAby HPLCafterAristolochiadebilisandNaolingtabletcommonboilling,toobservedchan geofAristolochiaacidA.ResultsAristolochiaacidAcontentofAristolochiadebiliswas markedlydecreasedafterNaolingtabletwasadded.ConclusionNaolingtabletcanm arkedlydecreasedAristolochhiaaicdAcontentofAristolochiadebilis. 【Keywords】naolingtablet;aristolochiadebilis;aristolochiaachidA;reducing poisonousness 青木香的药用标准虽然已被取消,但其中所含主要毒性成分马兜铃酸的解毒一直是许多 专家致力解决的问题。国内有 1 例服用“木通”导致肾损害,停用肾透析后连服中药六味地黄 丸加减使病情稳定,肾功能恢复正常的报道[1]。为了深入研究脑灵片对青木香的减毒作用 及机理,我们设计了以下实验。 1 仪器与试药 1.1 实验仪器日立 L6000 型高效液相色谱系统,包括 L-4200HUV-VISDetectorD2500 型色谱数据处理仪。MA240D 电子分析天平,上海第二天平仪器厂。GQ7OE-5 型红 外快速干燥箱,上海市吴淞五金厂。数显恒温水浴锅,金坛市大地自动化仪器厂。 1.2 药物青木香,为马兜铃科植物马兜铃 AristolochiadebilisSieb.etZucc.的干燥根, 购自中国生物制品检定所,批号:919-9001。脑灵片(糖衣片),甘肃省河西制药有限公司,批 号:050301。 1.3 试剂马兜铃酸 A 对照品(aristolochicacidA,以下简称 AA-I),中国药品生物制品检 定所,批号 110746-200406。甲醇、乙腈为色谱纯,山东省禹王实业总公司禹王化工厂。 无水乙醇、冰醋酸为分析醇,中国安徽医药公司。水为纯化水。自来水,符合国家饮用水标 准。 2 色谱条件 色谱柱:依利特 HypersilODS25(4.6mm×250mm),柱号:E:1417177。流速:1ml/ min。柱温:室温。检测波长:250nm。进样量:10μll。流动相:乙腈-(水+冰醋酸)=48:52, 其中,水:冰醋酸=62.5:1。理论塔板数不低于 2000。 3 试验方法与结果 3.1 标准溶液的制备称取 AA-I 对照品 7mg,置于 50ml 量瓶中,加无水乙醇溶解,并稀释 至刻度,摇匀,即得浓度为 0.14mg/ml 的对照品储备液,作为对照品储备液。精密量取对照 品储备液 2.00ml,于 10ml 量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,摇匀,即得浓度为 0.028mg/ml 的 AA-I 对照品溶液,作为对照品溶液。 3.2 供试液的制备 3.2.1 青木香样品溶液的制备精密称取青木香样品 0.6g,置于 200ml 烧杯中,加 120ml 自来水,煎煮 30min,过滤,收集滤液,残渣加 80ml 自来水,煎煮 30min,过滤,收集滤 液,合并 2 次滤液,置于水浴上,浓缩至干。用适量的无水乙醇溶解并完全转移至 10ml 的量 瓶中,加无水乙醇至刻度,摇匀。放入冰箱冷藏,静置过夜。抽取上清液过滤,弃去初滤液,收 集续滤液,放入 1ml 塑料离心管中,作为供试液 1。 3.2.2 青木香与脑灵片供试液的制备分别取青木香样品、脑灵片粉末少许,各精密称取 0.6g 置于 200ml 烧杯中,混合两种药物,加入 120ml 自来水,按 3.2.1 项下制备青木香样品 溶液的方法进行操作,其制备液作为供试液 2。 3.3AA-I 的定性分析分别吸取供试液 1 和对照品溶液,注入液相色谱仪,按 2 项下的色谱 条件,测绘其色谱图。色谱图见图 1。 3.4 标准曲线的制备精密吸取对照品储备液 1、2、3、4、5、6ml,分别置 10ml 的量 瓶中,用无水乙醇稀释至刻度。按 2 项下的色谱条件,依次进样测定,测得 AA-Ⅰ 的峰面积。以 AA-Ⅰ 的进样量(μlg)为横坐标,以对应的峰面积为纵坐标绘制标准曲线。由标准曲线可知,在 0.08~0.40μlg 之间,进样量与峰面积之间呈良好的线性关系,回归方程为 Y=1.7×105X+5248,相关系数 R=0.9999。 3.5 精密度试验精密吸取对照品溶液 10μll,按 2 项下的色谱条件,注入液相色谱仪,测定 对照品溶液的峰面积,平行测定 5 次。结果见表 1,表明精密度良好。表 1 精密度试验结果 3.6 稳定性试验在 2 项的色谱条件下,精密吸取供试液 110μll,注入液相色谱仪,测定,然 后于 2、4、8、12、24h 各测定 1 次,结果见表 2,表明供试品溶液在 24h 内测定结果稳定。 表 2 稳定性试验结果 3.7 重复性试验取青木香样品 0.6g,精密称定,共称取 5 份,照青木香样品溶液的制备项 下操作,制成供试品溶液。在 2 项下的色谱条件下,分别精密吸取供试品溶液各 10μll,注入液 相色谱仪,测定,计算 AA-Ⅰ 的质量。结果见表 3,说明该方法的重复性良好。 3.8 加样回收率试验取 0.2ml 供试液 1,用无水乙醇定容为 1ml,作为供试液 3。取 0.2ml 供试液 1,加入标准溶液 0.15ml,用无水乙醇定容为 1ml,作为供试液 4。取标准溶液 0.15ml,用无水乙醇定容为 1ml 作为供试液 5。取以上各供试液 10μll,按 2 项下的色谱条 件测定,测定结果:回收率为(99.5±0.5)%,RSD 为 0.5%。 3.9 青木香与脑灵片共煎前后 AA-Ⅰ 含量的变化(AA-Ⅰ 的定量分析)分别取供试液 1、2, 按 2 项下的色谱条件测定,并计算各样品中 AA-Ⅰ 的含量,结果见图 2 及表 4。表 3 重复性试 验结果表 4 青木香与脑灵片共煎后的 AA-I 含量 debilisandNaolingTablecommonboilling 结果表明,青木香与脑灵片共煎后,马兜铃酸 A 含量降低了 55.3%,可见,脑灵片可以明显降低青木香中马兜铃酸 A 的含量。 4 讨论 国内外学者现已公认,青木香的肾毒性与其所含主要成分马兜铃酸有关,而其中马兜铃 酸 A 为主要毒性成分[2],且含量较大,故将马兜铃酸 A 作为测试指标。在提取方法上为了尽 量符合临床实际,我们选用了加热水提的方法,提取次数为 2 次。 青木香行气止痛,解毒消肿,降血压,主治胃肠疼痛,风湿性关节炎,跌打损伤,咽喉肿痛,高 血压病,外用治牙痛,毒蛇咬伤等症[3]。湿热之邪极易伤阴,同时青木香行气亦易伤阴。故需 配伍养阴药,使邪正兼顾。肾阴为一身津阴之根,脑灵片既补气血,养心肾,又滋补肾阴,增强 正气,能防阴液之再耗。其滋阴之作用,恰恰能制约青木香的行气伤阴之性。因而脑灵片能 够降低青木香行气伤阴的副作用。 本研究表明,脑灵片可以明显降低青木香中马兜铃酸 A 的含量,为青木香等含马兜铃酸 类中药的解毒提供了科学依据和新的思路。 【摘要】目的研究紫茉莉(Mirabilisjalapa)种子的化学成分。方法利用各种色谱技术 进行分离和纯化,通过理化方法及 NMR、IR 和 MS 等方法解析其化学结构。结果从紫茉莉 种子的 80%乙醇提取物中分离到 3 个化合物,它们的结构分别被鉴定为:5,7,3’-三羟基-4’甲氧基黄酮(1),4’,5,7-三羟基黄酮(2),豆甾醇(3)。结论化合物 1,2 首次从该植物中分离得 到。 【关键词】紫茉莉;化学成分 【Abstract】ObjectiveToinvestigatethechemicalconstituentsfromtheseedso fMirabilisjalapa.MethodsVariouschromatographictechniqueswereusedtosepara tethechemicalconstituents.ThestructureswereidentifiedbyNMR,IRandMS.Result sThreecompoundswereidentifiedfromits80%alcoholextractas:5,7,3`trihydroxy-4`-methoxyflavanone,4`,5,7trihydroxyflavanone,stigmaasterol.ConclusionCompound1,2werefoundinthispl antforthefirsttime. 【Keywords】Mirabilisjalapa;chemicalconstituents 紫茉莉(MirabilisjalapaL),又名胭脂花、夜娇娇[1]、粉团花、野茉莉[2]等。据文献 报道,紫茉莉的根、叶、花和种子[3]均可入药,种子胚乳可治疗黄水疮、斑痣和粉刺等。但 因其种子成熟期不集中,而且随熟随落不便采集,所以目前国内外学者对紫茉莉化学成分的 研究主要集中在其根上。我们运用现代种植技术,成功开发了紫茉莉在陕北的垄沟种植法, 既方便了种子的采集,又提高了产量。在此基础上,我们对紫茉莉种子的化学成分进行了初 步的研究。从紫茉莉种子 80%(体积分数)乙醇提取物中分离到 3 个化合物,分别为 5,7,3’三羟基-4’-甲氧基黄酮(1),4’,5,7-三羟基黄酮(2),豆甾醇(3)。其中前 2 个化合物均为首次 从该植物中分离得到的化合物。 1 实验仪器与材料 XRC-1 型显微熔点仪(温度未校正);Pekin-Elmer983G 型红外光谱仪(KBr 压 片);Bruck-AR×500 型核磁共振仪(TMS 内标);MAT-711 型质谱仪;VarioEL 有机元素分 析仪;分析型 HPLC(Waters515-2996);AmberliteXAD-16 型大孔吸附树 脂;SephadexLH-20(Pharmacia 产品);色谱柱层析硅胶(200-300 目)由青岛海洋化工厂 产品。石油醚(60~90℃)、乙酸乙酯、氯仿、丙酮、甲醇均为分析纯。紫茉莉成熟种子采 集自陕西省延安市延川县。 2 提取与分离 紫茉莉成熟种子(8.12kg)粉碎后,在 50℃下用 80%乙醇浸泡 3 次,合并提取液,过滤, 减压浓缩获得浸膏 100.8g,浸膏加 300ml 水溶解,溶解部分再用 1.5L 乙酸乙酯分 3 次萃取。 合并乙酸乙酯萃取液,蒸干得 22.4g 粗提物。取 10g 粗提物上硅胶柱,用石油醚:丙酮=3:1 洗脱并分段收集得样品 A:302mg,B:128mg,C:217mg。样品 A、B 和 C 继续上 SephadexLH-20 凝胶柱,丙酮洗脱,各流分以 HPLC 检测,相同组分合并,从 A 中分离得到化 合物 1(83mg);从 B 中分离得到化合物 2(48mg);从 C 中分离得到化合物 3(26mg)。 3 结构鉴定 化合物 1 浅黄色粉状固体,mp318℃~319℃ (CH3OH),λmax:228nm,283nm,349nmmax:228nm,283nm,349nm。ESI(+)-MS 显示准分子离子峰 m/ z301[M+H]和 323[M+Na];元素分析得知碳、氢的百分含量分别为 63.77、4.12;质谱 结合元素分析提示该化合物的分子式为 C16H12O6;IR(KBr)cm13486,1702,1585,1518,1401;1HNMR(DMSO-d6)6:6.84(1H,s,3-H),6.22(1H,s,6H),6.46(1H,s,8-H),7.42(1H,s,2’-H),6.96(1H,d,J=8.6Hz,5’H),7.55(1H,d,J=8.6Hz,6’-H),3.95(3H,4’-OCH3),12.94(1H,brs,5OH),10.80(1H,brs,7-OH),9.92(1H,brs,3’-OH);13CNMR(DMSO-d6)6:163.9(C2),104.6(C-3),181.9(C-4),157.3(C-5),99.3(C-6),164.8(C-7),94.2(C-8),161.7(C9),103.5(C-10),118.4(C-1’),113.4(C-2’),146.5(C-3’),151.4(C-4’),112.1(C5’),123.6(C-6’),56.1(4’-OCH3),以上数据与文献报道的 5,7,3’-三羟基-4’-甲氧基黄酮相 符[4,5]。 化合物 2 浅黄色粉状固体,mp343℃~345℃ (CH3OH),λmax:228nm,283nm,349nmmax:214nm,269nm,339nm。ESI(+)-MS 显示准分子离子峰 m/ z271[M+H]和 293[M+Na];元素分析得知碳、氢的百分含量分别为 66.32、3.72;质谱 结合元素分析提示该化合物的分子式为 C15H10O5;IR(KBr)cm13420,1672,1605,1508,1433;1HNMR(DMSO-d6)6:6.78(1H,s,3-H),6.19(1H,s,6H),6.49(1H,s,8-H),7.93(1H,d,J=8.8Hz,2’-H),6.93(1H,d,J=8.8Hz,3’H),6.93(1H,d,J=8.8Hz,5’-H),7.93(1H,d,J=8.8Hz,6’-H),10.34(1H,brs,4’OH),10.71(1H,brs,7-OH),12.61(1H,brs,5-OH);13CNMR(DMSO-d6)6:165.3(C2),104.5(C-3),183.4(C-4),158.7(C-5),95.9(C-6),164.8(C-7),100.8(C-8),109.3(C9),105.5(C-10),122.8(C-1’),129.7(C-2’,6’),117.4(C-3’,5’),161.8(C-4’),以上数据与 文献报道的 5,7,4’-三羟基黄酮相符[1]。 化合物 3 白色针状结晶(丙酮),mp141℃~142℃,ESI(+)-MS 显示准分子离子峰 m/ z413[M+H]+和 435[M+Na];元素分析得知碳和氢的百分含量分别为:84.45、11.57;质 谱结合元素分析数据提示该化合物的分子式为 C29H48O,IR(KBr)cm13442(OH),2960,2940,1468,1385,1372;13CNMR(CDCl3)6:37.2(C-1),31.7(C2,7),71.9(C-3),42.3(C-4),140.8(C-5),121.6(C-6),31.9(C-8,25),50.3(C-9),36.7(C10),21.3(C-11),39.6(C-12),42.2(C-13),56.8(C-14),24.4(C-15),28.9(C16),56.0(C-17),12.3(C-18),19.5(C-19),40.4(C-20),21.1(C-21,26),138.3(C22),129.3(C-23),51.3(C-24),19.4(C-27),25.3(C-28),12.0(C-29),化合物 3 的波谱数 据与文献报道的豆甾醇的波谱数据[6]基本一致。 【摘要】目的研究医学护理对类风湿关节炎患者的疗效。方法随机将 64 例类风湿关 节炎(RA)患者分为护理组及对照组各 32 例,两组均给予正规药物治疗,对照组按风湿科护理 常规进行,护理组根据病情制定严格的护理计划,包括功能训练、心理教育,分别于治疗前和 治疗 24 周时对下列指标变化进行评估:晨僵时间、休息痛、关节压痛指数、关节肿胀指数、 双手平均握力、日常生活能力等,并查血沉(ESR)、C 反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF))等 实验室指标。结果治疗前两组病例各项指标差异均无显着性,治疗后护理组晨僵时间、关节 压痛指数、关节肿胀指数、休息痛、日常生活能力、握力均较对照组显着好转(P<0.05)。 治疗总有效率护理组显着优于对照组(P<0.05)。结论功能训练和心理教育对防止关节功能 下降,提高患者的自信心,预防畸形,促进关节功能恢复起到很大的作用。 【关键词】关节炎类风湿功能训练护理抑郁焦虑 【Abstract】ObjectiveTostudycurativeeffectsofmedicalnursingontherheum atoidarthritis(RA)patients.MethodsAcasecontrolstudywasconductedamong64RApatients,32ofwhichwereincludedinthec asegroupandtheotherswereinthecontrolgroup.Twogroupsweregivenregularme dicinetreatmentwithantirheumaticdrugs,thenursinggrouppatientsweregivenast rictnursinginstruction,includingfunctionexercises,thementaleducation.Timeof morning-stiff,restpain(VAS),jointpresspainindex,bothhandsequallygripstrength,andthedailylifeability,erythrocytesedimen tationrate(ESR),Creactiveprotein(CRP),rheumatoidfactor(RF))wereobservedatthebeginningoftrea tmentandtheendof24thweek.ResultsTherewassignificantdifferencebetweentwo groupsontimeofmorning-stiff、restpain(VAS),jointpresspainindex,equallygripstrength,thedailylifeability(P<0.05).Thetotalcurativeratioofnu rsinggroupishigherthanthatofthecontrolgroup(P=0.03).ConclusionF)unctionexer cisesandmentalinstructionhaveplayedanimportantroleinpromotingthejointfunc tioninstauration,keepingthejointfunctionfromdescend,raisingthepatient’sselfconfidentandpreventingjointsabnormal. 【Keywords】arthritis;rheumatoid;functionexercise;nursing;anxiety;depres sive 类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)是一种以关节炎为主要表现的自身免疫疾病, 在我国的患病率为 0.32%~0.36%[1]。主要表现为慢性、对称性、进行性多关节炎,最终 可导致关节畸形和功能丧失。除药物治疗外,加强关节功能训练不但能减轻症状,而且能明 显改善关节的功能,提高生活质量;心理教育可以缓解患者的思想压力,增强信心,提高对疼痛 的耐受性。我们采用以上方法治疗了 32 例 RA 患者,收到良好效果,现报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 2005 年 1 月~2007 年 1 月在我院专科病房与门诊确诊的 RA 患者 64 例,全部符合美国风湿病学会(ACR)1987 年关于 RA 的诊断标准[2]。其中男 20 例,女 44 例,年龄 12~72 岁,平均年龄(38.43±19.45)岁,病程 6 个月~15 年。将 64 例患者随机分 为护理组和对照组各 32 例。护理组中男 8 例,女 24 例,平均年龄(34.8±13.6)岁,平均病程 (52.3±33.6)个月;对照组中男 12 例,女 20 例,平均年龄(36.8±12.6)岁,平均病程