- 讲师:刘萍萍 / 谢楠
- 课时:160h
- 价格 4580 元
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摘要: 目的比较壁虎不同提取工艺成分对S180和H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及免疫器官的影响。方法以肉瘤S180、肝癌H22荷瘤小鼠作为动物模型,以抑瘤率及胸腺、脾脏指数为指标比较壁虎原粉及水煎煮、胃蛋白酶酶解、胰蛋白酶酶解、仿生酶解等不同工艺成分的抗肿瘤作用。结果3种酶解工艺成分对肉瘤S180和H22肝癌抑瘤率均明显高于原粉与水煎煮液,相比模型组有显著性差异(P< 0.05),但对荷瘤小鼠的胸腺指数、脾脏指数无明显影响。结论壁虎酶解工艺成分对S180、H22荷瘤小鼠均有明显抗肿瘤作用。
关键词: 壁虎; 酶解; 抗肿瘤; S180; H22
1 材料
1.2 仪器JJ-2型组织捣碎机,江苏江南仪器厂;摇摆式高速中药粉碎机,浙江大德中药器械有限公司;W-O型恒温水浴锅,上海申顺生物科技有限公司,TDL-5飞鸽牌离心机,上海安亭科学仪器厂;小型切向流超滤系统,美国Millipore公司(密理博)。
1 200 U/g),胰蛋白酶(酪蛋白转化力≥25.0),均购自国药基团化学试剂有限公司,注射用环磷酰胺,200 mg/支,江苏恒瑞医药股份有限公司,批号:08051354,氟尿嘧啶注射液(5-Fu),上海旭东海普药业有限公司,批号:080302。壁虎购自济南兴旺蟾业,经本校周风琴教授鉴定系壁虎科动物无蹼壁虎Gekko swinhonis Gunther的干燥全体,置干燥箱60℃以下真空干燥,粉碎,过80目筛,细粉备用。
2.1 供试品溶液的制备
2.1.2 水煎煮提取液的制备取壁虎细粉,加8倍量水煮沸煮沸60 min,离心,残渣加8倍量水煮沸30 min,离心,合并上清液,浓缩至1:0.5(每毫升药液相当于0.5 g药材,下同),即得水煎煮提取液。
2.1.4 胰蛋白酶酶解液的制备取"2.1.3"项下一份样品液,煮沸15 min,放冷,调节pH 7.5,移至55 ℃恒温水浴锅中,保温10 min,加入1%胰蛋白酶,3 h后取出,离心(4 000 r/min)10 min,取上清液,微滤(0.22 μm),超滤(相对分子质量3 000),收集相对分子质量小于3 000部分,浓缩至1∶0.5,即得胰蛋白酶酶解液。
2.2 抗肿瘤作用的比较
抑瘤率(%)=(空白组瘤重均值-样品组瘤重均值)/空白组瘤重均值×100%
2.2.2 对H22荷瘤小鼠的影响建模方法、给药方式、剂量均同S180荷瘤小鼠(对照组为5-Fu,25 mg·kg-1)。
3 结果
3.1.1 对S180荷瘤小鼠抑瘤率的影响结果见表1表1 对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的影响
3.2 对H22荷瘤小鼠的影响
责编:杨盛昌
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