医药学论文：论降糖保肾汤对糖尿病大鼠肾脏的影响

1 材料
1.2 动物Wistar雄性大鼠，体质量150～200 g;由延边大学医学部实验动物科提供。
2.1 JTBSD对STZ所致DM大鼠BUN、SCr、CCr的影响随机法将80只大鼠分为两组：10只大鼠列为正常组，正常组腹腔注射枸橼酸缓冲液;另70只单次腹腔注射STZ 50 mg/kg(临用前用0.05 mol/L枸橼酸缓冲液溶解，pH为4.4, 4℃)，注射STZ 72 h后，尾静脉采血测空腹血糖并同时测尿糖，血糖≥ 16.7mmol/L，尿糖"+++"以上者列入DM观察对象。再将造模成功的大鼠随机分为模型组(20只)、JTBSD组(15只)和BNPH组(15只)。造模7 d后，JTBSD组每天灌服JTBSD 30 g生药/kg体质量，BNPH组每天灌服BNPH 10 mg/kg体质量，正常组和模型组每日灌服等体积的蒸馏水，共12周。12周末，收集大鼠24 h尿液，记录尿量和检测尿素氮。之后，用3%水合氯醛10 ml/kg腹腔麻醉，心脏采血，测大鼠的BUN、SCr水平，并计算CCr。对4组数据用SPSS11.0软件进行单因素方差分析处理。结果见表1。表1 JTBSD对STZ所致DM大鼠BUN、SCr、CCr的影响
2.3 JTBSD对STZ所致DM大鼠肾脏细胞因子TGF-β1的影响实验大鼠分组、造模、给药同"2.1"项方法。12周末，打开腹腔快速切除肾脏，左肾肾脏皮质立即置入10%中性福尔马林液固定，用于免疫组化标本的制备。结果见图2。图2 JTBSD对STZ所致DM大鼠的肾脏细胞因子TGF-β1的影响(免疫组化染色，100×)
BUN和SCr都是机体蛋白质代谢产物，它们的浓度取决于氮的分解和肾的排泄功能，在摄入食物及体内分解代谢比较稳定的情况下，其浓度的多少取决于肾的排泄能力。因此，血清肌酐和尿素氮浓度在一定程度上可反映肾小球的滤过功能。DN时，原有的肾脏功能遭到破坏， BUN、SCr和CCr上升，双肾滤过率逐渐下降。TGF-β是一种多向性、多效性和多功能的细胞因子。在哺乳动物中存在三种形式的TGF-β，分别为TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3，其中TGF-β1所占比例最高(>90%)，活性也最强，是起主要作用的TGF-β因子[3,4]。TGF-β与其受体(TβR)结合后，通过细胞膜上的Smad蛋白可将TGF-β信号从细胞表面传至细胞核内，从而调节靶基因的转录。TGF-β1在DN进展中发挥着重要的作用，其介导肾脏病变的机制有如下几点：①TGF-β1刺激ECM积聚;②抑制细胞增殖、促进细胞肥大;③促进细胞凋亡;④改变细胞表型;⑤与其他细胞因子的相互作用。本实验表明JTBSD能明显降低DM大鼠的BUN、SCr、CCr，能够使DM大鼠肾组织系膜基质增生减轻、肾小球硬化明显减轻、血管水肿减轻，使DM大鼠肾组织中TGF-β1表达明显减少。JTBSD对DM大鼠肾脏具有明显的保护作用，其作用机制可能与防止肾脏功能改变、减轻大鼠肾脏组织病理改变、抑制肾脏细胞因子TGF-β1的表达有关。