医药学论文：论桂郁金水提物对小鼠出血与凝血时间的影响

1 材料和方法
1.2 桂郁金的提取方法［3］将桂郁金原药材（2008-08采自广西钦州市灵山县陆屋镇，经南宁市药品检验所鉴定）捣成碎块，称取2.0 kg，水浸泡2h后，煎煮两次，1h/次，滤过，合并滤液，用95%的乙醇沉淀，静置24h后滤过，合并滤液，旋转蒸发仪减压浓缩得桂郁金水提物，冰箱放置，备用。
1.4 出血时间的测定（剪尾法）［4，5］将小鼠随机分成5组，分别一次性灌胃给予高 （32 g·kg-1）、中 (16 g· kg-1)、低(8 g·kg-1)的桂郁金水提物、云南白药（10 g·kg-1）和生理盐水，1 h后按0.1 ml/10 g腹腔注射0.7 %硫喷妥钠，待小鼠完全进入麻醉状态后，用解剖剪距小鼠尾尖3 mm处横剪断，待血液自行溢出计时，每30秒用滤纸吸血1 次，直至血液自然停止所需的时间即为该鼠的出血时间。另将小鼠随机分成5组，分别灌胃给以高 （32 g·kg-1）、中 (16 g·kg-1)、低(8 g·kg-1)的桂郁金水提物、云南白药（10 g·kg-1）和生理盐水，连续灌胃5 d，1次/d，末次给药1 h后，按上述方法测定小鼠的出血时间。
1.6 凝血时间的测定（玻片法）［5，6］将小鼠随机分成5组，分别灌胃高、中、低桂郁金水提物、云南白药和生理盐水，连续灌胃5 d，末次给药1 h后用毛细管于小鼠左眼内球后静脉丛取血，滴两滴在玻片上并同时计时，每30秒用清洁针头在玻片上挑血丝一次，当有血丝出现时计时完毕，即得凝血时间。另将小鼠随机分成5组，分别一次灌胃给以高、中、低桂郁金水提物、云南白药和生理盐水，1 h后按照以上方法测定凝血时间。
数据以±s表示，用Microsoft Excel进行数据处理，统计分析采用t检验。
2.1 急性毒性试验经预试验测得该药的毒性剂量范围约为100～320 g·kg-1， 相邻两组剂量之间的比例为r=1∶0.8 较为合适。根据预试结果，设计正式实验各组的剂量，分别为：104.9 g，131.1 g，163.8 g，204.8 g，256.0 g/kg，以0.2 ml·10g-1的剂量一次性灌胃给予10只小鼠。结果见表1。表1 桂郁金水提物对各组小鼠用药、死亡情况（略）
2.2 桂郁金水提物对小鼠出血时间的影响从表2中可以看出一次性灌胃给予桂郁金水提物，剂量为32，16 g·kg-1时，出血时间明显缩短，与空白组比较P＜0.01，剂量为8 g·kg-1 时，与空白组比较出血时间无明显差异。当连续给小鼠灌胃桂郁金水提物5 d，剂量为32，16 g·kg-1时，与空白组比较，出血时间无明显差异。桂郁金水提物剂量为8 g·kg-1时，与空白组比较P＜0.05，出血时间明显缩短。 表2 桂郁金水提物对小鼠出血时间的影响（略）