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摘要: 【目的】建立檀香叶总黄酮含量的测定方法,分析乙烯利刺激对檀香叶中总黄酮含量的影响。【方法】采用紫外分光光度法测定檀香叶中总黄酮含量。【结果】未经刺激的檀香叶总黄酮含量在6967~7281 mg/g之间。经过刺激的檀香叶总黄酮含量在10571~16798 mg/g之间。【结论】乙烯利刺激能提高檀香叶中总黄酮含量。
关键词: 檀香/化学 总黄酮/分析 乙烯利刺激 分光光度法,紫外
植物激素刺激在一定程度上能促使檀香提前结香,提高挥发油含量且不影响檀香品质[3-5]。目前国内外对檀香研究的报道主要集中于檀香栽培种植技术和檀香挥发油组分分析以及檀香药材质量评价上[6]。本研究在乙烯利刺激檀香结香试验的同时,分析测定了檀香叶中总黄酮含量,并探讨了乙烯利刺激对其含量的影响。现报道如下。
1.1 实验材料及处理檀香叶样品采自广东省湛江南药试验场,树龄均为5年,采集时间和处理方式见表1。乙烯利刺激为在檀香树干距地面20 cm处钻孔,用胶带封好洞口后,注射一定量不同浓度的乙烯利溶液,注射相同量水即为水刺激。采集部位为檀香树中上部,檀香原植物经广东省中药研究所邱金裕研究员鉴定为檀香科植物檀香Santalum album L.。采摘后的叶子自然平摊失水后50℃烘干,粉碎后过60目筛,干燥器中室温密封保存。表1不同样品采集时间和处理方式(略)
2 方法与结果
2.1.1 芦丁对照品溶液的制备精密称取经105℃干燥至恒重的芦丁标准品适量,加甲醇溶解并定容至50 mL,配成03048 mg/mL的芦丁标准溶液。
2.2 波长的选择取对照品溶液和样品溶液适量,移入25 mL的容量瓶中,加入甲醇至6 mL,各加50 g/L的亚硝酸钠溶液10 mL,振摇后放置6 min,再加入100 g/L的硝酸铝溶液10 mL,摇匀后放置6 min,加10 mol/L氢氧化钠溶液10 mL,用甲醇定容至刻度,摇匀后放置15 min。以 0 mL为空白,采用紫外-可见光分光光度法[1],在200~800 nm波长范围内进行扫描,结果对照品和样品在500 nm处均有最大吸收,见图1。
2.4 方法学考察
2.4.2 重复性试验精密称取同一供试品10 g,平行5份,按212项下方法提取及22项下方法测定其黄酮含量,结果含量均值为7023 mg/g,sR为035%,表明该方法的重复性较好。
2.4.4 加样回收率试验精密称取已测含量的样品S1(含量6967 mg/g),加入芦丁进行回收率试验,结果其平均回收率为10032%,sR为203%,见表2。表2回收率试验结果(略)
对表3中未刺激组和刺激组数据进行成组设计的假设检验,方差齐性检验结果显示两组数据方差不齐,采用t′检验,结果表明未刺激组和刺激组的总黄酮含量差异具有显著性意义(P< 001)。从表中也可以看出刺激后的样品总黄酮含量远高于未刺激样品的。对于刺激组内,不同的刺激处理组间比较差异无显著性意义。刺激2个月后檀香叶总黄酮含量均显著升高,刺激4个月后叶中总黄酮含量虽有所下降,但仍显著高于刺激前叶中总黄酮含量。
黄酮类化合物是植物体内重要的次生代谢产物,也是体内具有生理活性的主要成分之一[7]。有关檀香叶中黄酮类成分的含量还未见报道,本研究考虑黄酮类作为植物体内一种重要的活性物质,采用紫外分光光度法对总黄酮含量进行测定分析,结果发现从未经刺激的檀香植株上不同时间采集的檀香叶总黄酮含量无明显差异,但刺激后檀香叶中总黄酮含量显著高于未刺激者,何种原因导致这种差异有待进一步研究。此外,虽然不同浓度乙烯利刺激和水刺激都能提高檀香叶中总黄酮的含量,但目前檀香药材的主要利用部位为树干心材,乙烯利刺激不仅能提高檀香叶中总黄酮含量,还能使檀香树干心材提前结香[5] ,而水刺激不能,因此乙烯利刺激是值得研究的处理方法。
责编:杨盛昌
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