医药学论文：益气开秘方对结肠慢输型便秘大鼠肠动力和肠神经肽的影响

【摘要】 共纳入80只无特定病原体级大鼠，将60只造成结肠慢输型便秘模型，并随机分为模型组、西沙比利组和益气开秘方组（简称中药组），其余20只设为正常对照组。以碳末推进百分率、离体肠肌条收缩频率及振幅、一氧化氮合酶1（nitric oxide synthase-1， NOS1）和P物质为观察指标。结果:模型组的碳末推进百分率较正常对照组明显降低（ P < 0.05），中药组和西沙比利组均明显高于模型组 （ P < 0.05） 。模型组与正常对照组相比，其各肠段肠肌条收缩的频率和振幅明显降低，中药组和西沙比利组与模型组比较均有提高（ P < 0.05）。模型组结肠肠壁组织NOS1阳性细胞面积百分比明显高于正常对照组、西沙必利组和中药组，中药组与正常对照组相比，差异无统计学意义（ P >0.05）。模型组P物质阳性细胞面积百分比较正常对照组明显下降，中药组与正常对照组相比，差异无统计学意义（ P >0.05）。结论:益气开秘方可通过提高大鼠肠道平滑肌收缩的频率和振幅来促进肠道动力。其作用途径与调控肠神经丛NOS1和P物质阳性表达有关。
结肠慢输型便秘（slow transit constipation， STC）是由于胃肠道传输功能障碍所致的便秘，其相关发病因素众多，但确切发病机制尚未明确。近年我科以恢复胃肠传导功能为治疗原则，将益气开秘方应用于结肠慢输型便秘的临床治疗，取得了满意效果。本课题旨在通过动物实验证实益气开秘法对肠道运动的调节作用，并主要从肠道神经肽P物质（substance P， SP）和一氧化氮合酶1（nitric oxide synthase-1， NOS1）的角度探讨其作用机制。
1.1 材 料
1.1.2 药物 益气开秘方由生黄芪30 g、生白术15 g、枳壳12 g、杏仁12 g、生地黄15 g、火麻仁15 g组成，由龙华医院制剂室按2000年版药典要求，制备成水煎剂，约含生药量2 g/ml。 根据《中药药理研究方法学》［1］计算出中药人鼠等效剂量，2 ml/次， 2次/d 灌胃。西安杨森制药厂生产的西沙必利（普瑞博思）为对照药物，规格为5 mg/片。用生理盐水溶解至约含药量0.05 mg/ml，根据《中药药理研究方法学》［1］计算人鼠等效剂量，2 ml/次，2次/d灌胃。
1.2 造模方法 参考文献［2］用口服复方苯乙哌啶加酚酞的方法建立大鼠结肠慢输型便秘模型。饲喂3个月造模成功后分组给药。
1.3.1 动物分组 采用完全随机方法分为模型组、西沙必利对照组和中药组，另设正常对照组。每组各20只大鼠。分组当日起给药，连续给药4周后取 材。
1.4 观察指标与方法
1.4.2 离体肠肌条动力测定 将放在充氧、保温（37 ℃左右）的台氏液中的肌条，一端固定在CW-3型平滑肌槽下端的弯钩，另一端固定于拉力换能器（量程10 g）。肌条放入含有持续充氧的台氏液容器中，待自发活动稳定后，描记正常曲线3 min，张力变化通过多道生理记录仪记录到微机，以Chart 4.0软件分析记录，统计肌条收缩的振幅及频率。
1.5 统计学方法 采用SSPS 11.5软件，碳末推进百分率、肠管肌条收缩的振幅及频率、NOS1和P物质阳性细胞的积分光密度均采用方差分析的方法作组间差异的比较。
2.1 肠道碳末推进试验检测碳末推进百分率 模型组较正常对照组明显降低，中药组和西沙比利组较模型组均明显提高，中药组与正常对照组比较，差异无统计学意义。见表1。
Table 1 Comparison of percentage of carbon propelling in 4 groups
2.2 离体肠管肌条收缩活动 模型组各肠段肠管肌条收缩的频率和振幅较正常对照组明显降低。中药组和西沙比利组与模型组比较，频率和收缩振幅均有提高，差异有统计学意义。中药组和西沙比利组的升结肠段肠管肌条收缩的频率和振幅与正常对照组比较差异无统计学意义。见表2和图1。