医药学论文：HO

【摘要】 目的 探讨HO-1在肺腺癌组织中的表达状况。方法 采用反转录－多聚酶链式反应（RT-PCR）方法检测27例单纯肺腺癌组及10例正常对照组织（距癌组织大约10cm）中HO-1 mRNA表达水平。结果 37例标本均进入半定量结果分析。肺癌组mRNA表达量（0.84±0.03），正常对照组HO-1 mRNA表达量为（0.39±0.02），两组有显著性差异（P< 0.05）。结论 HO-1在肺腺癌中明显的高表达，为防治肺癌提供新思路。
【关键词】 肺腺癌；血红素氧合酶-1；逆转录-多聚酶链式反应
【Abstract】 Objective To investigate the expression of HO-1 mRNA in pulmonary adenocarcinoma.Methods Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect HO-1 mRNA expression in specimens from 27 pulmonary adenocarcinoma and 10 normal tissues around the pulmonary adenocarcinoma away about 10cm.Results All the 37 specimens were involved in the analysis of half quantity results. The relative contents of HO-1 mRNA was (0.84±0.03) and (0.39±0.02) in 27 pulmonary adenocarcinoma and 10 normal tissues around the cancer.Significant difference existed between the two groups.（P< 0.05）.Conclusion HO-1 mRNA expression content was significantly high.
【Key words】 pulmonary adenocarcinoma；hemeoxygenase-1；RT-PCR
血红素氧合酶(hemeoxygenase，HO)是一种血红素降解的催化酶和限速酶，可将血红素分解成一氧化碳(carbon monoxide，CO)、胆红素和铁。已发现HO有3种同工酶［1］，分别为HO-1、HO-2及HO-3。HO-1在呼吸系统疾病中已有广泛研究，而在肺腺癌实体中HO-1表达情况尚未有文献报道。为探讨HO-1在人肺癌组织中的表达状况，我们采用RT-PCR方法检测27例肺腺癌及正常组织中HO-1 mRNA的表达情况，结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 病理资料 肺腺癌组：选择2004～2005年黑龙江省佳木斯市肿瘤结核医院肺癌手术标本，组织学诊断采用1981年WHO肺癌组织学分类标准。正常对照组：为肺腺癌手术患者中余10例无其他基础性疾病，在远离癌组织约10cm取肺组织。均为手术切除后立即取材，液氮冷冻。
1.2 引物序列及合成 HO-1引物依照文献［2］设计的序列，由北京奥科生物技术有限责任公司合成，引物序列如下：上游引物：5'-CGG GCC AGC AAC AAA GTG-3'；下游引物：5'-AGT GTA AGG ACC CAT CGG AGA A-3'，扩增片段长度为107bp。β-actin内参照引物，由北京奥科生物技术有限责任公司合成，上游引物：5'-TCC TCC CTG GAG AAG AGC TA-3'，下游引物：5'-TCA GGA GGA GCA ATG ATC TTG-3'，扩增的目的片段长度为302bp。
1.3 组织总RNA的抽提 试剂合购自宝生物（大连）公司。取100mg冷冻保存的组织标本，在液氮内研磨，取90mg加入已装好1ml Trizol的EP管中，剧烈振荡，静置5min，用1ml针筒抽吸2次。加入200μl氯仿，用力摇晃15s，静置2~3min，12000r/min 4℃离心15min，将上清移入另一EP管中，加入500μl异丙醇，静置10min，12000r/min 4℃离心10min，弃上清，加入75％乙醇1ml洗RNA 2次，7500r/min 4℃离心5min，干燥RNA，加无RNA酶的水30μl在60℃孵育10min，琼脂糖凝胶电泳鉴定RNA质量，紫外分光光用紫外/可见光分光光度计检测A260、A280，确定RNA纯度及浓度。所有实验中的塑料制品都经1%DEPC处理后高压灭菌。