2017年解放军文职人员招聘考试-农学类考试资料：生物化学一级结构的测定

 （一）一级结构

　　蛋白质的一级结构是指肽链的氨基酸组成及其排列顺序。氨基酸序列是蛋白质分子结构的基础，它决定蛋白质的高级结构。一级结构可用氨基酸的三字母符号或单字母符号表示，从N-末端向C-末端书写。采用三字母符号时，氨基酸之间用连字符（－）隔开。

　　（二）测定步骤

　　测定蛋白质的一级结构，要求样品必须是均一的（纯度大于97％）而且是已知分子量的蛋白质。一般的测定步骤是：

　　1.通过末端分析确定蛋白质分子由几条肽链构成。

　　2.将每条肽链分开，并分离提纯。

　　3.肽链的一部分样品进行完全水解，测定其氨基酸组成和比例。

　　4.肽链的另一部分样品进行N末端和C末端的鉴定。

　　5.拆开肽链内部的二硫键。

　　6. 肽链用酶促或化学的部分水解方法降解成一套大小不等的肽段，并将各个肽段分离出来。

　　7.测定每个肽段的氨基酸顺序。

　　8.从第二步得到的肽链样品再用另一种部分水解方法水解成另一套肽段，其断裂点与第五步不同。分离肽段并测序。比较两套肽段的氨基酸顺序，根据其重叠部分拼凑出整个肽链的氨基酸顺序。

　　9. 测定原来的多肽链中二硫键和酰胺基的位置。