- 讲师:刘萍萍 / 谢楠
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红细胞Rh血型系统检查
要点1:
Rh遗传基因位于第1号染色体的短臂上,Rh血型有3个紧密相连的基因位点,每一位点有一对等位基因(D和d,C和c、E和e),这3个基因是以一个复合体形式遗传。3个连锁基因可有8种基因组合,即CDe、cDE、cDe、CDE、Cde、cdE、cde和CdE,两条染色体上的8种基因组合可形成36种遗传型。
要点2:
Rh抗原命名为C、D、E、c、d、e,虽从未发现过d抗原及抗d活性,但仍保留“d”符号,以相对于D。因此,Rh抗原只有5种,有相应5种抗血清,可查出18种Rh表现型。临床上,习惯将有D抗原者称Rh阳性,而将虽有其他Rh抗原而无D抗原者称为Rh阴性。D阴性人中最常见的基因型为cde/cde。
已发现40多种Rh抗原,与临床关系最密切的5种为D、E、C、c、e,这5种抗原中D的抗原性最强,对临床更为重要。
DU(弱D):为一组弱D抗原。尽管DU的抗原性较D为弱,但仍是Rh阳性细胞,所以将DU血输给Rh阴性受血者时,仍有引起产生抗D的可能性,因此应将DU型供血者作Rh阳性处理,而DU型受血者归入Rh阴性则较为安全。如果把DU血输给有抗D者,也可以产生严重的溶血性输血反应。
-D-:-D-/-D-遗传基因型红细胞只有D抗原,而缺乏C、c、E、e抗原。此型能与抗D抗体在盐水中凝集。
要点3:
Rh抗体中,除偶尔可见天然的抗E、抗CW抗体外,其余各种Rh抗原的抗体多系输血或妊娠时,由外来红细胞免疫刺激后产生。这些抗体均为IgG,但在免疫应答的早期,也可有IgM成分。
D抗原是非AB0红细胞抗原中免疫性最强的抗原,可以引起抗D的产生,抗D与D红细胞产生严重的溶血反应。习惯将D阴性者认为是Rh阴性,多不再进行其他Rh抗原检测,除D抗原外,通常抗E和抗c比较多见。抗CW及抗其他Rh抗原的抗体偶尔也可引起迟发性溶血性输血反应或新生儿溶血病。
要点4:
红细胞Rh表型可用特殊的具有抗D、C、c、E和e抗血清检测来鉴定。虽然Rh血型系统中有许多种抗原,但常规只用抗D血清检查有无D抗原。当有特殊需要如家系调查、父权鉴定、配血不合等情况时才需用抗C、抗c、抗E、抗e等标准血清做全部表型测定。Rh抗体属IgG,不能在盐水介质中与红细胞发生凝集,因此必须采用以下几种鉴定方法。
1.低离子强度盐水试验:可提高抗D抗体与D阳性红细胞结合率,并提高其灵敏度。
2.酶介质法:木瓜酶或菠萝酶可以破坏红细胞表面的唾液酸,使红细胞膜失去电荷,缩小红细胞间的距离;同时酶还可以部分地改变红细胞表面结构,使某些隐蔽的抗原得以暴露,增强凝集性;且对IgG的作用大于IgM,故有利于检出不完全抗体。
试剂:IgG型抗D标准血清、1%木瓜酶(或菠萝蛋白酶)溶液、5%D阳性红细胞生理盐水悬液、5%D阴性红细胞生理盐水悬液。
要点5:
注意事项:
①Rh血型系统的抗体多由获得性免疫产生,血清中很少有天然抗体,故不需要做反定型。
②对照:酶易失活,故每次试验都要设置阳性对照。若阳性对照不出现凝集,表明酶或抗血清已经失效。酶活性过强出现假阳性结果,因而要设立阴性对照,以排除假阳性。只有在阳性对照管出现凝集而阴性对照管不凝集的情况下,才说明被检管的结果是可靠的。
③结果阴性:说明被检红细胞上无相应抗原,但由于DU抗原性弱,因此,如被检者无凝集,还应进一步检查以排除DU的可能。
要点6:
(四)交叉配血法
Rh血型系统的交叉配血的原则与AB0血型系统的交叉配血相同。由于此系统的抗体为不完全抗体,故应选用酶介质法、抗球蛋白法或聚凝胺法等。
要点7:
质量控制
1.严格设定试剂和抗原阳性和阴性对照系统。
2.严格控制反应条件:试验介质、浓度、温度、离心、反应时间等条件。
3.受检者红细胞必须洗涤干净,以免血清蛋白中和抗球蛋白,出现假阴性。
责编:刘卓
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