- 讲师:刘萍萍 / 谢楠
- 课时:160h
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血浆蛋白质的测定、参考值、方法评价及其临床意义
蛋白质测定方式大体可分为:
1.用化学方法测定血清(浆)总蛋白、白蛋白和球蛋白的含量及白蛋白与球蛋白的比例;
2.用蛋白电泳方法测定蛋白质的组分;
3.用免疫化学法特异测定个别蛋白,如用免疫比浊法测前清蛋白。通过制备特异的抗血清,测定Ag-Ab复合物,多用试剂盒。
(一)血清总蛋白测定方法及临床意义
1.测定方法:双缩脲比色法(推荐蛋白质定量方法)
原理:蛋白质分子中的肽键在碱性条件下与Cu2+作用生成紫红色的化合物,颜色深浅在一定浓度范围内与蛋白含量成正比。经与同样处理的蛋白标准液比较,即可求得蛋白质含量。
评价:操作简便、重复性好;只对蛋白作用,氨基酸无反应,各种蛋白呈色相近;缺点是灵敏度较低。
参考区间:血浆总蛋白随年龄增大有所增高,60岁后则有所下降,新生儿为46~
2.临床意义:血清总蛋白生理性波动。
(1)血清总蛋白增高
1)血液浓缩,导致总蛋白浓度相对增高:严重腹泻、呕吐、高热时急剧失水,血清总蛋白浓度可明显升高。休克时,血液可发生浓缩;慢性肾上腺皮质功能减退的患者,由于丢失钠的同时伴随水的丢失,血浆也可出现浓缩现象。
2)血浆蛋白质合成增加:主要是球蛋白合成增加,见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症患者。
(2)血清总蛋白降低
1)各种原因引起的血液稀释,导致总蛋白浓度相对降低:如静脉注射过多低渗溶液或因各种原因引起的钠、水潴留。
2)长期摄入不足及消耗增加:如食物中长期缺乏蛋白质或慢性胃肠道疾病所引起的消化吸收不良。因患消耗性疾病,如严重结核病,甲状腺功能亢进,恶性肿瘤等,均可造成血清蛋白浓度降低。
3)蛋白质丢失:如严重烧伤、肾病综合征、溃疡性结肠炎等,使蛋白质大量丢失。
4)蛋白质合成减少:各种慢性肝病。
(二)血清清蛋白测定方法及其临床意义
1.测定方法:
溴甲酚绿法(BCG法):是一种阴离子染料,在pH4.2的缓冲液中,与白蛋白结合成复合物,溶液由未结合前的黄色变成蓝绿色,在628nm波长的吸光度与白蛋白浓度成正比,经与同样处理的清蛋白标准液比较,即可求得白蛋白的含量。
参考区间:0~4天为28~
2.临床意义
1)清蛋白浓度增高:严重脱水,血浆浓缩。
2)清蛋白浓度降低:同总蛋白浓度降低。
(三)球蛋白的含量及白蛋白与球蛋白的比例
1.球蛋白的含量:是通过血清总蛋白测定值减去血清清蛋白测定值计算出来的。
2.临床意义:
1)球蛋白浓度增高
多见于感染性炎症、自身免疫性疾病(系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等)和肿瘤(多发性骨髓瘤和淋巴瘤)。
多发性骨髓瘤是一种单克隆疾病,它是由浆细胞恶性增殖造成的异常高的单一Ig(多见于IgA或IgG)血症。
2)球蛋白浓度降低
见于血液稀释、严重的营养不良、胃肠道疾病等。
3.清蛋白与球蛋白比值(A/G比值)
A/G比值反映了清蛋白与球蛋白浓度变化的关系。正常A/G比值为1~2/1。临床上常用A/G比值来衡量肝脏疾病的严重程度,当A/G比值小于1时,称比值倒置,为慢性肝炎或肝硬化的特征之一。
溴甲酚绿法测定血清白蛋白显色原理是
A.溴甲酚绿在pH7.6环境中与白蛋白形成蓝绿色化合物
B.溴甲酚绿在pH9.2环境中与白蛋白形成蓝绿色化合物
C.溴甲酚绿在pH4.2环境中与白蛋白形成蓝绿色化合物
D.溴甲酚绿在pH8.6环境中与白蛋白形成蓝绿色化合物
E.溴甲酚绿在pH4.7环境中与白蛋白形成蓝绿色化合物
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下列可能导致血清总蛋白增高的原因是
A.营养不良
B.消耗增加
C.急剧失水
D.肝功能障碍
E.消耗性疾病
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(四)血清蛋白电泳分析
1.原理:血清中各种蛋白质的等电点不同,在同一pH电场中所带电荷量也不同,加之蛋白质的分子量亦不相同,所以在同一电场中电泳迁移率就有差异。醋酸纤维素薄膜电泳及聚丙烯酰胺凝胶电泳是目前临床生物化学检验中最常用的电泳技术,按其泳动速度可将血清(浆)蛋白质分成分为五条区带,从正极到负极依次为白蛋白和α1、α2、β、γ-球蛋白。
通过染色和光密度扫描可计算出各区带蛋白质占总蛋白的百分含量,是了解血清(浆)蛋白质全貌的有价值的方法。
在琼脂糖凝胶电泳中常可分出13个区带。如果采用聚丙烯酰胺凝胶电泳在适当条件下可以分出30多个区带。
责编:刘卓
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