- 讲师:刘萍萍 / 谢楠
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结核分枝杆菌检验如下:
一、结核分枝杆菌——生物学特性
1、形态与结构
形态:细长或略带弯曲;培养基中可呈球状或丝状;陈旧培养物或干酪化的淋巴结中可见到分枝状排列。显微镜下常堆积成团、成束,排列无序,也有呈链状、索状。
特殊结构:无鞭毛和芽胞,部分有荚膜。
2、培养特性
营养要求:较高。
气体环境:专性需氧。
温度环境:35~40℃,最适35~37℃;pH6.5~6.8。
兼性胞内寄生菌。
少量铁质可使细菌产生分枝杆菌生长素,促进生长。
3、菌落特点
生长缓慢,最快的分裂速度为18h一代。
固体培养基(罗氏培养基):需2~6周才能长出菌落。菌落呈干燥颗粒状,不透明,乳白色或米黄色,表面呈皱纹状,形似菜花。
液体培养基:生长较快,形成菌膜。有毒力菌株在液体培养基中可呈索状生长。
选择培养基:常用选择剂有结晶紫、孔雀绿、青霉素、萘啶酸、林可霉素、多黏菌素B等。
二、结核分枝杆菌——微生物检验及鉴定
标本采集:结核分枝杆菌作分离培养,必须使用灭菌容器。应停药1~2d后再采集标本。
形态学检查
1)直接涂片:齐-尼抗酸染色,找抗酸菌。
原理:根据结核分枝杆菌细胞壁特点
方法:初染(石炭酸复红)→固定(加热)→脱色(5%盐酸酒精)→复染(碱性美蓝)
结果:革兰氏阳性杆菌。红色——抗酸细菌 蓝色——非抗酸细菌
2)荧光显微镜检查法:金胺“O”染色,在荧光显微镜下分枝杆菌可发出橘黄色荧光。
分离培养:人工、半自动、自动;
生化试验(鉴定)
糖类 发酵 试验 |
触酶 试验 |
耐热触酶试验 | 聚山梨酯-80水解试验 | 耐热磷酸酶试验 | 尿素 水解 试验 |
中性试验 | |
结核分枝杆菌 | - | + | - | - | - | + | + |
三、结核分枝杆菌——致病性及临床意义
1、致病物质:荚膜、脂质、蛋白质。不产生内毒素和外毒素。
2、所致疾病:
引起多种组织器官的结核病其中以通过呼吸道引起的肺结核最多见。肺外感染可发生在脑、肾、肠及腹膜等处。
3、结核分枝杆菌药敏试验的药物主要包括:利福平、乙胺丁醇、异烟肼等。
【练习题】关于结核分枝杆菌,叙述错误的是
A.少量铁质可促进结核分枝杆菌生长,铁质可使其产生结核分枝杆菌生长素
B.在结核分枝杆菌选择培养基中,一般要加入抗菌药物,抑制杂菌生长
C.结核分枝杆菌为杆菌
D.触酶试验阳性
E.耐热触酶试验阳性
【答案】E【解析】结核分枝杆菌耐热触酶试验阴性。
责编:刘曦
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