- 讲师:刘萍萍 / 谢楠
- 课时:160h
- 价格 4580 元
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1 前言白色念珠菌是犬猫皮肤病中最常见病原菌之一,其治疗方法目前主要是采用抗菌素进行。但这些抗菌素除了少数几种外,大多数很快就有抗药性菌株产生,给临床治疗造成极大的困扰, 中国是中草药的故乡,采用中草药防治人畜皮肤疾病有着悠久的历史,中草药和药用植物资源十分丰富。所以我们设想利用中草药防治宠物的皮肤病,也为宠物疾病防治开辟另一个用药途径提供依据,而且用中草药治疗有着其他化学药物不可替代的优点,某些中草药可以从根本上治愈皮肤病,而且中草药还有资源丰富、价格低廉等优势。所以本试验研究旨在尝试开发另一兽医药物领域,充分利用药用植物资源,筛选数种高效无害、无毒副作用、无耐药性的药用植物,用于治疗犬猫皮肤疾病,由于受时间和环境条件限制,本试验只能在实习的宠物医院所在地和附近地区野生的几种药用植物对在宠物医院门诊和住院的病畜身上分离并培养得到的的白色念珠菌进行抑菌效能试验和皮肤病治疗试验。2 试验材料2.1 试验动物试验动物采用莱阳宠物医院门诊和住院的病畜,有斗牛犬、波斯猫和一些患皮肤病的门诊宠物病例。2.2 菌株本试验所使用的菌株:白色念珠菌( Candida albicans, 编号为 a-7504 )。这些菌株均由莱阳宠物医院病畜身上分离而来。经莱阳农学院动物科技学院微生物实验室鉴定确认。 2.3 培养基本试验所需要的琼脂平皿培养基为市售沙保弱(沙泊氏)的真菌培养基 Sabourauds dextrose agar(SDA),其主要成分为琼脂(寒天)、胨、葡萄糖、酵母、硫酸镁、磷酸钾等。 2.4 药用植物供试品的制备供试的10种药用植物均为不同地方购买的鲜品和干品。丁香因为含挥发油较多,故采用挥发油提取和煎剂制备两个步骤,供试时采用挥发油、煎剂、挥发油和煎剂合并液三种形式。羊蹄、芦套和凤仙因为临床上习惯用鲜品,所以这里也采取鲜品和煎剂两种形式,其他各药均用三次煎剂的合并液浓缩为每毫升含生药1克用高压灭菌 120℃ 15分钟备用。2.5 白色念珠菌镜检刮取病畜搔痒部位的皮肤皮屑,在低倍显微镜下镜检,当看到白色念珠茵茵落呈黄白色奶油状的念珠茵茵落时,可确定为白色念珠菌引起的皮肤病。 表 1 10种药用植物科属和学名 3 试验方法3.1药敏试验方法3.1.1菌悬液的配置 先将上述菌种根据该菌株的习性采用试管斜面培养基进行 27℃一星期的培养 ,经检确认后用灭菌生理盐水调制成 100CCFU (Colong forming runit/ml,菌落形成单位)供试。3.1.2平皿打孔 药用植物对不同菌株的药敏试验采用常规体外药敏试验即平皿打孔法,先将供试菌液均匀涂布在SDA 培养基表面,再用琼脂打孔器(直径6mm)在平板上打孔、封底。3.1.3加样 采用微量加样器分别吸取供试药用植物液加入各孔,每孔均为50微升。3.1.4植物的药敏试验 按常规药敏纸片法测定,即取直径6mm灭菌滤纸分别浸入各种试验药液中40分钟后取出备用 ,供试时放入己备好的抑菌平皿中。3.1.5细菌培养 根据白色念珠菌的习性把PH值调至5.6,在27℃的条件下恒温培养7天。3.1.6判定 按药用植物抑菌圈的标准量取抑菌圈直径,即菌圈直径在10mm以下者为耐药,用"+"表示 ,10~15mm 为中敏,用 "++" 表示,16mm以上者为高敏,用"+++"表示。3.2 治疗用药液的配制方法3.2.1外浴药液置备与用法 将丁香、羊蹄、地肤子、千里光按 1:1.2:1.2:1.5 的比例,配成外浴液的基础液,配制方法为取上述4种中草药不同的剂型进行配制。具体配制过程为取丁香的挥发油与煎剂合并液,加上羊蹄鲜品与煎剂的合并液、地肤子煎剂和千里光煎剂,再加入盐10~20克备用。外浴时,取外浴基础液兑等量的温开水即成50%的浓度的外浴液,将病畜泡入配制好的外浴液浴盆中,外浴液用量要求能淹没患畜的脖子,让其浸泡, 头部可适当滔些浴液淋浇冲洗,每天不少于两次,一次约半小时,连续5天。3.2.2内服药液置备与用法 将鱼腥草、梳子、艾叶、千里光按 1:1.2:0.5:0.8 的比例,煮半个小时到一个小时 ,煎成 1:1 的浓度备用。内服时,把己配制好的内服药液按2ml/kg体重的用量内服,一天服l次
责编:杨盛昌
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