医药学论文：p27蛋白在肝门部胆管癌的表达及临床意义

【摘要】 目的 探讨p27蛋白在肝门部胆管癌的表达及临床意义。方法 采用免疫组化方法测定44例肝门部胆管癌及8例正常胆管组织中p27蛋白的表达情况。结果 p27表达的阳性率为77.2%，以低表达为主。p27的表达与肿瘤的分化、淋巴转移及神经浸润显著相关（P＜0.05）。p27蛋白高、低及阴性表达组的平均生存时间分别为84个月、72个月与65个月。p27蛋白低表达组与缺失组的生存曲线明显低于高表达组生存曲线。结论 肝门部胆管癌中p27的表达是反映肝门部胆管癌生物学行为和判断预后的重要指标。
【关键词】 肝门部胆管癌;p27蛋白;免疫组化
Expression of p27 in hilar cholangiocarcinoma and its clinical significance
【Abstract】 Objective To discuss the expression of p27 in hilar cholangiocarcinoma and explore its clinical significance.Methods Forty-four hilar cholangiocarcinoma samples and normal bile ducts tissues were collected in General Hospital of PLA from 1996 to 2000.The expression of p27 was determined by immuneohistochemical method.Results The positive rate of p27 were 77.2% in cancerous tissues，but 100% in the control group.Meanwhile，p27 expression had a significant correlation with differentiation of hilar cholangiocarcinoma，lymph node metastases and perineural invasion.The survival curve of the group with low or absent p27 expression was significantly lower than that of the group with high p27 expression.Conclusion Our results suggest that aberrant expression of p27 maybe associated with the incidence and development of hilar cholangiocarcinoma and can be regarded as prognostic markers.
【Key words】 hilar cholangiocarcinoma;p27;immunohistochemistry

1 材料与方法
1.1 材料 选取我院1996～2000年经手术切除、术前未行放化疗、有明确病理结果及有详细随访资料的肝门部胆管癌标本44例，用中性福尔马林固定，常规石蜡包埋。其中男29例，女15例，中位年龄53岁(17～73岁)。按临床分期，Ⅰ～Ⅱ期15例，Ⅲ期0例，Ⅳ期29例，其中Ⅳa期27例，Ⅳb期2例。其中高分化腺癌13例，中分化腺癌17例，低分化腺癌9例。对照组标本选取行根治性切除的胆管癌标本的远端切缘的正常胆管组织。
1.2 方法 鼠抗人p27蛋白单克隆抗体购于北京中杉金桥生物技术有限公司，工作浓度为1∶20。抗兔/鼠通用型免疫组化检测试剂盒购于上海基因有限公司。免疫组化染色采用两步法（做高温高压抗原修复）。用已知p27蛋白阳性的正常扁桃体组织（由北京中杉金桥生物技术有限公司提供）作为阳性对照，用PBS代替一抗做阴性对照。
1.3 结果判断标准 参考Michelangelo Fiorentino［1］p27蛋白以细胞核或胞核伴胞质内出现棕黄色颗粒为阳性结果，每张切片选5个高倍视野进行细胞计数，按阳性细胞数占同类细胞的百分比。p27的表达分为，高表达组：阳性细胞≥50%；低表达组：阳性细胞＜50%；及阴性表达组，无阳性细胞染色。
1.4 统计学方法 采用四格表χ2检验。生存分析采用Kaplan-Meier法，生存率的比较采用Log-rank检验，以P＜0.05为差异有显著性。Kaplan-Meier曲线由Stata自动生成。
2 结果
2.1 p27蛋白在肝门部胆管癌中的表达 p27蛋白染色阳性细胞为细胞核着色。p27蛋白阳性率为77.3%(34/44)，以低表达为主。其中高表达14例（31.8%），低表达20例（45.5%），阴性表达10例（22.7%）。而对照组中，p27蛋白阳性率为100%(8/8)，以高表达为主。
表1 p27蛋白与临床病理参数的关系 （例）

 

 

注：*P＜0.05，**P＜0.01