医药学论文：4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对CCl4及Dgal致小鼠急性肝损伤的保护作用

【摘要】 目的 观察合成的4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对四氯化碳(CCl4)和D半乳糖 (Dgal)致小鼠急性肝损伤的影响。方法 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物预防给药后观察其对CCl4和Dgal致急性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、谷草转氨酶 (AST) 、碱性磷酸酶(ALP) 及还原型谷胱甘肽(GSH) 水平的影响。结果 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物可降低急性肝损伤小鼠血清ALT、TBIL、AST、ALP，还原型谷胱甘肽(GSH)含量升高。结论 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对CCl4和DGal所致小鼠急性肝损伤具有保护作用。

　　【关键词】 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物；CCl4；D半乳糖；肝损伤

　　Abstract:Objective To investigate the effects of clausenamide derivative on carbon tetrachloride (CCl4) and Dgalactosamine (Dgal) induced acute liver injury in mice. Methods The mice were pretreatment with clausenamide derivative prior to the administration of CCl4 and Dgal, and the changes of serum alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), total bilirubin (TBIL) , alkaline phosphatase（ALP）and glutathione (GSH) in these mice were examined respectively. Results Clausenamide derivative significantly reduced CCl4 and Dgal inducing acute hepatic injury by decreasing ALT, AST, TBIL and ALP in serum; and GSH levels in test group were higher. Conclusion Clausenamide derivative had good protective effects on acute hepatic injury in mice.

　　Key words:clausenamide; carbon tetrachloride; Dgalactosamine；liver injury

　　急性肝炎是临床上常见疾病,主要临床特征为肝脏损害,血清中常出现明显的谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、谷草转氨酶(AST) 、碱性磷酸酶(ALP) 升高，除了化学试剂、药物、毒物、病毒的直接作用外,机体内免疫功能紊乱也起关键作用，对人类健康危害极大。有研究表明［1-3］, 黄皮酰胺类化合物具有抗自由基，对D半乳糖 (Dgal) 和四氯化碳(CCl4)诱导的实验性肝损伤有保护作用。本文采用CCl4和Dgal诱导小鼠发生实验性急性肝损伤，观察合成的4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对CCl4和Dgal致小鼠急性肝损伤的影响。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 实验动物 昆明种小鼠，普通级，雌雄各半，体质量18～22 g，由广东省实验动物中心提供，合格证号：2007A022，分笼饲养，室温(22±2) ℃，相对湿度45%～60%，自动控制昼夜各12 h，颗粒饲料喂养，自由饮水。

　　1.1.2 药品与试剂 受试物黄皮酰胺系列衍生物为本校药化教研室林汉森课题组提供。四氯化碳(CCl4) 西安化学试剂厂(批号：990806)；D半乳糖(DGalacto samine, Dgal) 北京化工厂产品( 批号:870522)；联苯双酯滴丸，广州星群(药业)股份有限公司生产（批号：DF40100）；其他试剂均为国产分析纯。

　　1.2 方法

　　1.2.1 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用 取昆明小鼠70 只，随机分为7组，即空白对照组、CCl4模型对照组、溶媒对照组（60%丙二醇）、阳性对照药组（0.75%的联苯双酯滴丸混悬液150 mg/kg）、4苯基卤代黄皮酰胺衍生物低、中、高剂量组（25 、50 、100 mg/kg），每组10只。4苯基卤代黄皮酰胺衍生物低、中、高剂量组药物均用60%(φ)丙二醇配制。各给药组每天按设定剂量灌胃给药1次，给药容积 0.15 mL/10 g，空白对照组与CCl4模型对照组给予等量的生理盐水，溶媒对照组给予等量的溶媒（60%丙二醇），连续7 d。末次给药1 h后，腹腔注射给予10% CCl4花生油溶液（V∶V），给药容积为10 mL/kg，空白对照组腹腔注射给予等量的溶媒（花生油）。24 h后眼球取血,常规分离血清,用Vital 2200 型自动生化测定仪测定血清ALT、TBIL、AST、ALP、GSH含量。

　　1.2.2 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对Dgal致小鼠急性肝损伤的保护作用 取昆明小鼠70 只，随机分为7组，即空白对照组、Dgal模型对照组、溶媒对照组（60%丙二醇）、阳性对照药组（0.75%的联苯双酯滴丸混悬液150 mg/kg）、4苯基卤代黄皮酰胺衍生物低、中、高剂量组（25 、50 、100 mg/kg），每组10只。4苯基卤代黄皮酰胺衍生物低、中、高剂量组药物均用60%(φ)丙二醇配制。各给药组每天按设定剂量灌胃给药1次，给药容积 0.15 mL/10 g，空白对照组与Dgal模型对照组给予等量的生理盐水，溶媒对照组给予等量的溶媒（60%丙二醇），连续7 d。末次给药1 h后，,除空白对照组外余各组小鼠按800 mg/kg腹腔注射给予Dgal,24 h后眼球取血,常规分离血清,用Vital2200 型自动生化测定仪测定血清ALT、TBIL、AST、ALP、GSH含量。

　　1.3 统计学处理

　　实验数据以±s表示，采用SPSS 10.0软件进行t检验，P< 0.05为差异有显着性。

　　2 结果

　　2.1 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用

　　CCl4可致小鼠血清ALT、 TBIL、AST、ALP明显升高, GSH含量下降。而阳性对照药联苯双酯则可以明显降低ALT、TBIL、AST、ALP，升高GSH水平，提示其对CCl4致小鼠急性肝损伤有较好的保护作用，与模型组比有统计学意义（P< 0.05）。4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对CCl4致小鼠急性肝损伤具有保护作用，呈明显的量效关系，即随着 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物用药剂量的增加，小鼠血清ALT、TBIL、AST、ALP水平逐渐降低，GSH水平逐渐升高，中剂量组（50 mg/kg）与模型组相比，ALT、AST降低（P< 0.05），对TBIL、ALP和GSH则影响不大；而高剂量组（100 mg/kg）与模型组比，ALT、AST、TBIL、ALP降低，GSH水平升高（P< 0.05）。见表1。

　　表1 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用（略）

　　Tab.1 Protective effects of clausenamide derivative on CCl4 induced acute liver injury in mice.

　　与模型组相比：*P< 0.05，**P< 0.01

　　2.2 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对Dgal致小鼠急性肝损伤的保护作用

　　Dgal可致小鼠ALT、 TBIL、AST、ALP明显升高， GSH含量下降。而阳性对照药联苯双酯则可以明显降低ALT、TBIL、AST、ALP，升高GSH水平，提示其对Dgal致小鼠急性肝损伤有较好的保护作用，与模型组相比有统计学意义（P< 0.05）。4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对Dgal致小鼠急性肝损伤具有保护作用，呈明显的量效关系，即随着4苯基卤代黄皮酰胺衍生物用药剂量的增加，小鼠血清ALT、TBIL、AST、ALP水平逐渐降低，GSH水平逐渐升高。与模型组相比，明显降低 ALT、AST、TBIL水平，有统计学意义（P< 0.05）；对ALP水平虽然有一定程度的降低，并升高GSH水平，但是与模型组相比无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

　　表2 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对Dgal致小鼠急性肝损伤的保护作用（略）

　　Tab.2 Protective Effects of clausenamide derivative on Dgal induced acute liver injury in mice

　　与模型组比较: *P< 0.05，**P< 0.01

　　3 讨论

　　Liu GT等［4-6］研究结果表明,黄皮酰胺类化合物有抗肝细胞损伤作用，对正常小鼠肝药酶有调节作用，它们可诱导或抑制肝微粒体P45