医药学论文：实时荧光PCR和RT

【摘要】 目的 通过2种检测登革病毒方法的比较，以提高检测登革病毒的灵敏度和特异性。方法 利用Taqman MGB技术，根据登革病毒3′端非编码区的一段高度保守序列，设计登革1～4型荧光PCR通用引物和TaqmanMGB探针，以登革热毒株作为标准，以乙脑毒株作对照，建立实时荧光PCR检测登革病毒的快速方法。并对10份ELISA法检测阳性的临床血清标本进行RT-PCR及荧光PCR扩增。结果 RT-PCR检测10份临床血清标本，2份阳性，阳性率为20%。实时荧光PCR检测登革病毒与乙脑病毒无交叉反应，检测10份临床血清标本，5份阳性，阳性率为50％。从RNA提取到检测结果仅需4h。结论 Taqman MGB实时PCR检测方法快速、敏感性高、特异性强，可作为登革病毒的快速检测方法，应用于登革热的临床早期诊断。
【关键词】 登革病毒；RT-PCR；Taqman GMB实时PCR