医药学论文：重组人血管内皮抑素I期临床研究

［摘要］ 目的 评价重组人血管内皮抑素的人体安全性和药代动力学特征。方法 将27例健康受试者分成4个剂量组，分别为30 mg/m2(3例)、60 mg/m2（8例）、120 mg/m2（8例）、180 mg/m2（8例），均单次静脉输注重组人血管内皮抑素；16例恶性肿瘤患者，分3个剂量组，分别为10 mg/m2(10例)、20 mg/m2（3例）、30 mg/m2（3例），每组连续静脉输注重组人血管内皮抑素28天；27例健康受试者及10例恶性肿瘤患者（10 mg/m2）采用美国Quantikine免疫分析药盒测定血清重组人血管内皮抑素浓度，进行药代动力学研究。结果 全组未见明显的剂量限制性毒性，少数出现一定的心脏毒性，如窦性心动过速、心肌缺血、室性期前收缩、窦性心律不齐。其他不良反应有皮疹、腹泻、发热、疲劳。可评价患者16例中，MR 1例、SD 14例、PD 1例。单次给药组Cmax和AUC随给药剂量提高呈线性增加，Vd和Cl也随剂量相应提高；多次给药组药物谷浓度在连续给药1周左右达到稳态水平，连用28天，在体内的维持浓度较低且不会产生明显蓄积。结论 初步观察治疗肿瘤有一定疗效，推荐Ⅱ期临床试验的剂量为每次10 mg/m2，每日1次，连续给药28天，以进一步考察本药对肿瘤患者的疗效和安全性。
［关键词］ 重组人血管内皮抑素;Ⅰ期临床研究;剂量限制性毒性;药动学
重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin)于1997年初从小鼠血管内皮细胞瘤的细胞(EOMA)培养液中分离得到，是一种小鼠胶原蛋白十八(collagen ⅩⅧ)C末端183个氨基酸20 kD的蛋白质片断，具有抗血管生成（anti-angiogenesis）抑制肿瘤生长的作用。本试验的重组人血管内皮抑素采用大肠杆菌表达制备获得，分子量为20 kDa，共由184个氨基酸、552个核苷酸组成，有2对二硫键，无糖基化位点，不加任何修饰，与天然人源的内皮抑素氨基酸序列相同，属于抗血管生成疗法中的肿瘤血管形成抑制剂类型。现对本品的临床Ⅰ期研究结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 病例选择
1.1.1 健康受试者 入选标准：年龄18～45岁，50 kg以上标准体重。无心、肝、肾及血液系统疾病史，试验前临床体检、血常规、肝肾功能、心电图检查均为正常并签署知情同意书。排除标准：体检及各项检查超过正常范围者；年龄未满18周岁或超过45周岁者，妊娠和哺乳期妇女；近4周内参与其他临床试验者；长期服药、吸烟、饮酒者；有药物过敏者。
1.1.2 肿瘤患者 入选标准：有明确病理或组织学依据诊为恶性肿瘤、因各种原因难以实施其他更有效治疗者；18~65岁，男女性别不限；ECOG体力状况：0～1分；预期生存期超过3个月；血常规、肝肾功能基本正常，心电图检查均为正常，距上次化疗至少4周。排除标准：妊娠和哺乳期妇女;血液系统疾病；严重脑疾病，原发或转移性脑瘤；4周内参加过其他临床试验者；有药物过敏史者；试验中采用其他抗肿瘤药物治疗者。
1.2 试验方法
1.2.1 药物来源 重组人血管内皮抑素注射液由江苏吴中实业股份有限公司苏州中凯生物制药厂提供(生产批号： 20050901)，水针剂，15 mg/（15 ml·支），2 ℃~8 ℃冰箱避光保存。
1.2.2 给药方法 （1）取出本品，注入250 ml生理盐水中静脉滴注，匀速滴注时间2 h。（1）单次给药：按照临床前试验数据和临床剂量递增原则，设计4个剂量组，分别为30 mg/m2、60 mg/m2、120 mg/m2、180 mg/m2，最小剂量组为3例，其余3组各8例。(2)连续给药：选择恶性肿瘤患者，设计3个剂量组，分别为10 mg/m2(10例)、20 mg/m2（3例）、30 mg/m2（3例），每组连续给药28天，给药结束后继续观察1周。（3）终止剂量升级的标准：如某组中出现1例剂量限制性毒性（DLT），还需在同一剂量组增加3例，在增加的病例中如未发现DLT，可升至下一个剂量组，如再出现1例以上DLT即终止试验。在给予试验设计的最大剂量仍未出现Ⅲ度及以上毒性反应，研究者认为该剂量范围已经可以满足有效性研究的需要，此时也可终止试验［1］。（4）伴随用药：试验中如出现Ⅲ度以上不良反应，应给予积极的抢救及治疗。试验中可使用必要的药物治疗感染、出血及其他伴随疾病，但应记录在案。一般不宜预防性使用抗过敏及对出、凝血功能及心功能有明显影响的药物［2］。
1.3 观察指标 单次给药组受试者给药前、后测定心率、呼吸、血压、脉搏、体温，给药后每2 h测定1次血压、心率至24 h，并随时记录与用药有关的不良反应，治疗前、治疗后第3、7天测定血常规、凝血、二聚体检查、肝肾功能、尿常规、心电图。
多次给药组肿瘤患者给药前、后，每天测定心率、呼吸、血压、脉搏、体温，并进行心电监护至停药后2 h，若给药过程中出现心脏的不良反应，行心电监护及对症处理，给药前3天内、给药后3天、10天、17天、24天、31天测定血常规、凝血、二聚体检查、肝肾功能、尿常规、心电图检查。
1.4 不良反应及疗效评价标准 不良反应按照美国国立癌症研究所（NCI）制定的通用毒性评价标准（CTC）分为0~4级。疗效根据2000年NCI提出的实体瘤疗效评价标准（RECIST）进行［3］。
1.5 重组人血管内皮抑素药代动力学检测 采血时间［4］：在单次给药组的60 mg/m2、120 mg/m2、180 mg/m2剂量组进行药代动力学试验，分别在给药前、静脉注射后1、5、15、30 min、1、2、4、8、12、24、48和72 h取静脉血。多次给药的10 mg/m2剂量组参加药代试验，第1、7次给药前以及给药后15、30、45 min，1、1.5、2、4、8、12和24 h。第3、5、14、28次给药前2 h（根据单次给药峰浓度时间而定）和24 h。第28次给药后48 h、72 h取静脉血。每次采集静脉血约3 ml，4 ℃ 3000 r/min，离心10 min后取出血清，置-20 ℃冰箱保存待测。采用美国R&D Systems公司重组人内皮抑素为抗原免疫动物生成的多克隆抗体药盒测定人血清中重组人血管内皮抑素。
1.6 药代动力学参数计算及统计学方法 用3p97实用药代动力学计算程序及统计矩法估算药代动力学参数，用梯形法计算药-时曲线下面积AUC。同一受试者数据用配对t检验，不同组间用组间t检验。采用方差分析或χ2检验来比较人口学资料和其他基础值指标。计量资料行配对t检验，计数资料行χ2检验。所有统计学计算采用Excel或SPSS统计软件。
2 结果
2.1 耐受性试验
2.1.1 单次给药组 （1）入组情况：共纳入健康受试者27例。其中，30 mg/m2剂量组3例，60 mg/m2、120 mg/m2、180 mg/m2剂量组各为8例，各剂量组受试者的年龄、身高和体重资料均具有可比性（P>0.05)。（2）安全性结果：60 mg/m2剂量组受试者用药后体温、呼吸、心率及收缩压的均值较用药前高，经配对t检验，差异有显著性(P< 0.05)，但其值均在正常范围内，无临床意义。其他剂量组受试者的生命体征用药前后均稳定，经配对t检验，差异无显著性(P>0.05)。（3）不良反应结果：30 mg/m2和60 mg/m2剂量组在用药前后，均未出现明显不良反应。120 mg/m2剂量组出现Ⅰ度皮疹1例，在用药后第1天，以面部及双上肢稍多，持续5天，未经任何治疗痊愈；Ⅰ度恶心伴腹泻1例，Ⅱ度腹泻1例，均在用药结束后第4天恢复正常；180 mg/m2剂量组出现Ⅰ度腹泻2例，用药结束后第3天恢复正常。各剂量组均未出现血液学、生化及肝肾功能毒性。30 mg/m2剂量组中出现1例窦性心律不齐，60 mg/m2剂量组中出现3例窦性心律不齐。120、180 mg/m2剂量组中未见心电图改变。见表1。