【摘要】 目的 建立小鼠肝细胞的体外培养方法,同时检测乙醇对肝细胞脂肪酸β-氧化速度的影响。方法 采用戊巴比妥麻醉小鼠,通过肝脏灌注和胶原酶消化分离小鼠肝细胞,接种于胶原包被的培养皿中进行体外培养。通过HE染色观察细胞的生长状态。在20mmol/L乙醇存在的情况下,通过3H标记的棕榈酸(C16:0)检测肝细胞的脂肪酸氧化速度。结果 成功地分离了肝细胞,肝细胞的存活率≥95%。肝细胞在体外培养48h仍能够保持良好的生长状态。对肝细胞脂肪酸氧化速度的研究发现,20mmol/L酒精能够导致肝细胞的脂肪酸氧化速度降低40%左右,导致肝细胞中脂肪含量增加。结论 本研究成功地建立肝细胞的体外培养方法,采用3H标记的脂肪酸能够敏感地检测脂肪酸氧化速度,而研究发现乙醇能够抑制肝细胞脂肪酸氧化速度。同时,本研究结果为肝细胞的脂肪和糖类代谢的研究提供了实验条件。
【关键词】 乙醇;肝细胞;脂肪酸
The effect of ethanol on fatty acid oxidation of mice primary hepatocytes
4天),肝细胞生长出现排列紊乱,细胞突触增多(图1B),并可见细胞分裂像(图1C)。
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