医药学论文：抗核小体抗体检测诊断系统性红斑狼疮的评价

【摘要】 目的 探讨抗核小体抗体（AnuA）检测及AnuA与抗双链DNA抗体（抗dsDNA抗体）、抗核抗体（ANA）等特异性抗体联合检测诊断系统性红斑狼疮（SLE）的价值。方法 ANA采用间接免疫荧光法，抗dsDNA抗体、AnuA采用ELISA法，分别对48例SLE病人、44例病例对照病人及20例正常人进行检测。结果 AnuA阳性率72.9%，特异性95.5%；抗dsDNA抗体阳性率54.2%，特异性95.5%；ANA阳性率91.5%，特异性50%。AnuA与抗dsDNA抗体联合检测，阳性率81.3%，特异性95.5%。结论 单一指标用于SLE的诊断AnuA最好，抗dsDNA抗体次之，ANA最差；AnuA与抗dsDNA抗体联合检测诊断SLE阳性检出可互补，能提高阳性率，且特异性好，是诊断SLE较好的联合检测指标。
【关键词】 系统性红斑狼疮；抗核小体抗体
系统性红斑狼疮（SLE）是一种累及多系统多器官的自身免疫性疾病。其主要特征是体内产生多种抗核抗体（ANA），如抗双链DNA抗体(抗dsDNA抗体)、抗史密斯抗体（抗SM抗体）、抗组蛋白抗体、抗核糖体P蛋白抗体、抗核小体抗体（AnuA）等，而引起自身多组织、多器官以血管炎为特征的弥漫性损害的疾病［1］。目前SLE的实验室检查主要检测血清ANA、抗dsDNA抗体、AnuA等。本文对此三项指标检测诊断SLE的价值进行了探讨，结果报告如下。

 

　　1 材料与方法

 

　　1.1 研究对象 研究组为2003年11月～2005年6月我院门诊和住院SLE患者48例，男6例，女42例，年龄18～52岁，病程6个月～4年，诊断均符合美国风湿病学会SLE诊断标准［2］。病例对照组44例，男4例，女40例，年龄17～69岁，病程4个月～6年，均为我院门诊和住院病人，其中类风湿性关节炎30例，皮肌炎3例，干燥综合征4例，混合性结缔组织病3例，系统性硬化症4例。正常对照组20例，男10例，女10例，年龄20～50岁，为无偿献血者。

 

　　1.2 方法

 

　　1.2.1 标本的采集与处理 抽取患者静脉血，充分凝固后离心取血清保存于-20℃低温冰箱，检测前解冻后检测。

 

　　1.2.2 AnuA检测 采用德国欧蒙公司提供的AnuA第二代ELISA检测试剂盒，批号E050504EA。严格按说明书进行操作。设阴阳性对照孔，结果判断：≥20U/ml为阳性。

 

　　1.2.3 抗dsDNA抗体检测 采用上海德波生物有限公司提供的抗dsDNA抗体ELISA检测试剂盒，批号20050412。严格按说明书进行操作。设阴阳性对照孔，结果判断：≥10U/ml为阳性。

 

　　1.2.4 ANA检测 采用德国欧蒙公司提供的ANA检测试剂盒，批号T050512TB。以Hep-2细胞和猴肝为基质片，按说明书应用间接免疫荧光法检测。设阴阳性对照，结果判断：血清稀释≥1:100显示荧光判为阳性。

 

　　1.3 统计学方法 采用χ2检验。

 

　　2 结果

 

　　2.1 各观察组AnuA、抗dsDNA抗体、ANA检测结果 SLE中自身抗体的阳性率：ANA最高，为95.8%； AnuA次之，为72.9%；抗dsDNA抗体最低，为54.2%。特异性：AnuA和抗dsDNA抗体较高，均为95.5%，而ANA仅50%。见表1。

 

　　表1 各观察组AnuA、抗dsDNA抗体、ANA检测结果 （略）

 

　　2.2 48例SLE患者AnuA与抗dsDNA抗体检测结果比较 阳性率AnuA为72.9%，高于抗dsDNA抗体的54.2%，差异有显著性（χ2=4.75，P＜0.05）。13例抗dsDNA抗体阴性而AnuA阳性，4例AnuA阴性而抗dsDNA抗体阳性。见表2。

 

　　表2 48例SLE患者AnuA与抗dsDNA抗体检测　（略）

 

　　2.3 48例SLE患者单独检测AnuA与联合检测AnuA和抗dsDNA抗体结果比较 阳性率联合检测为81.3%，高于单独检测AnuA的72.9%，差异有显著性（χ2=4，P＜0.05）。见表3。

 

　　表3 48例SLE患者单独检测AnuA与联合检测AnuA和抗dsDNA抗体结果比较 （略）

 

　　3 讨论

 

　　核小体是构成染色质的基本单位，每个核小体是由180～200个bp绕八聚体核心组蛋白构成的复合物，染色质纤维由紧密排列的核小体组成［3］。在细胞凋亡过程中核酸内切酶活化分切割核染色质、染色质释放核小体［4］。核小体作为免疫原，可被抗原提呈细胞如单核细胞提呈给CD4+Th2细胞， Th2细胞增殖活化，激活B细胞产生AnuA，形成抗原抗体复合物参与SLE的发病［5］。2000年Amoura等对596例患者用酶联免疫法检测AnuA，结果发现AnuA-IgG仅见于三种结缔组织病，即 SLE阳性率71.5%，系统性硬化症（SSC）阳性率45.9%，混合性结缔组织症（MCTD）阳性率45.0%，是狼疮肾炎的标记性抗体［6］。

 

　　用间接免疫荧光法检测病人血清ANA，能检测出多种风湿性疾病的存在，如系统性硬化症、干燥综合征、未分化结缔组织病、多发性肌炎、类风湿性关节炎，也能作为SLE的诊断指标。但正因其能于多种风湿性疾病中出现，阳性率高，特异性低，故不能作为SLE诊断的特异性指标，而用作筛选试验。

 

　　诊断SLE，AnuA、抗dsDNA抗体都有较高的特异性，抗dsDNA抗体在狼疮肾炎的过程中可与肾小球基底膜结合，该反应是由核小体介导的，即核小体既能产生AnuA，又能产生抗dsDNA抗体，作为SLE的特异性抗体，它们的阳性率各不相同，其中AnuA的阳性率要高于抗dsDNA，与文献［7］结果基本一致。且高水平的AnuA几乎是仅在SLE中出现［8］，提示AnuA可能是诊断SLE比抗dsDNA更特异的指标。尤其对于抗dsDNA抗体阴性的SLE患者的诊断更具有临床应用价值。