医药学论文：三种纤维蛋白原测定方法的评价

【摘要】 目的 探讨三种纤维蛋白原（Fib）测定方法的临床应用价值。方法 用免疫比浊法、PT衍算法（PT-der）、克劳斯（Von claus）法测定低、中、高值血清的纤维蛋白原含量，并进行比较。结果 免疫比浊法结果与PT-der法、克劳斯法相比有明显的差异（P< 0.05）。PT-der法和克劳斯法对样本的测定具有在Fib含量在2～4g/L时测定结果无统计学差异（P>0.05），在Fib＞4g/L和Fib< 2g/L时差异均有显著性（P< 0.05）。结论 建议在临床实验室尽快采用准确、快速和简便的克劳斯法测定纤维蛋白原含量。

 

　　【关键词】 纤维蛋白原；免疫比浊法；PT-der法；克劳斯法

 

　　Evaluation of three methods for fibrinogen detection

 

　　【Abstract】 Objective To evaluate 3 methods for fibrinogen detection.Methods Immunoturbidimetry , PT-der method and von Klaus method were used to determine fibrinogen in high-, middle- and low- value plasma samples and compared their results.Results Immunotubidimetry had significant difference (P< 0.05) comparing to PT-der method and von Klaus method. When the content of fibrinogen was 2-4g/L, there was no significant difference between the PT-der method and von Klaus method (P>0.05). However, there was marked difference between these 2 methods when fibrinogen content was lower than 2g/L or over 4g/L(P< 0.05).Conclusion von Klaus method is more accurate, faster and simpler and should be of first choice for laboratory test of fibrinogen.

 

　　【Key words】 fibrinogen; lmmunoturbidimetry; PT-der method; von 　　Klaus method

 

血浆纤维蛋白原（Fib）水平的变化与凝血障碍、出血性疾病、弥漫性血管凝血（DIC）以及炎症反应等有密切关系。近年来，发现Fib是心脑血管疾病的重要危险因素之一［1，2］，因而在临床上倍受重视，纤维蛋白原的测定方法很多，本研究对我国目前较常用的免疫比浊法，NCCLS推荐的克劳斯法［3］和通过自动化凝血仪测定凝血酶原时间（PT），进而推算出Fib含量的简便的PT算法（PT-der）并进行比较，目的在全面评价和筛选适合我国目前条件下最佳的Fib测定法。

 

　　1 材料与方法

 

　　1.1 血浆

 

　　1.1.1 正常血浆 取自健康体检人员。

 

　　1.1.2 异常血浆 Fib增高的血浆取自临床心血管疾病，血栓病、糖尿病、恶性肿瘤的患者；Fib减低的标本，是用生理盐水不同稀释的正常血浆标本。

 

　　1.2 试剂 (1)免疫比浊法 采用日立7060全自动生化分析仪，试剂统一由北京利德曼公司提供。(2)克劳斯法和PT-der 法采用全自动血凝分析仪，试剂盒为配套试剂盒。

 

　　2 结果

 

　　2.1 三种方法的精密度与准确度比较 将正常参与血浆分别用免疫比浊法、PT-der法、克劳斯法测定Fib值，每种方法的Fib值均为测定20次的平均值，见表1。

 

从表1可以看出，3种方法精密度均可，但准确度不一，PT-der法、克劳斯法比较接近靶值，免疫比浊法误差为27.97%。

 

　　表1 三种方法的精密度与准确度比较　略

 

　　2.2 三种方法对正常混合血浆和高、低值血浆的Fib测定结果 见表2。

 

　　表2 三种方法对正常血浆、高、低值血浆Fib测定结果比较　略
从表2可以看出，免疫比浊法与PT-der法、克劳斯法的测定结果相比差异均有显著性(P< 0.05)。测定值高于克劳斯法和PT-der法，Fib含量 在2～4g/L之间时，PT-der法与在克劳斯法测定结果无统计学意义(P>0.05)，当Fib＞4g/L和Fib< 2g/L时，PT-del法与克劳斯法结果差异均有显著性（P< 0.05），表现为PT-del法的测定值高于克劳斯法。

 

　　3 讨论
目前测定纤维蛋白的方法众多，大体上分三大类，(1)可凝固蛋白质，又称功能法。(2)物理、化学测定法。(3)免疫学测定法［4］，在正常情况下三者也密切相关，实验证明在异常情况下，三者有明显的差异。功能法测定是建立在Fib经凝血酶作用后形成纤维蛋白凝块基础上的，最能直接反映Fib的凝血功能，物理化学法是根据蛋白质的理化特性建立的，这种方法特异性差，影响因素多。免疫学方法目前多采用抗Fib多克隆抗体与Fib起免疫反应，其所针对的抗原决定簇也存在于纤维蛋白质单体，纤维蛋白（原）降解产物（FDP）和异常Fib中，因而特异性比较差。克劳斯法和PT-del法均为功能法，其中克劳斯法是美国国家临床检验标准委员会（NCCLS）推荐的方法，该法操作简便、快速，结果与Jocdbsson法（WHO与NIBSC推荐的参考方法）相比相关性良好。但Fib的异质性FDPS（如X、Y片段和D-二聚体等）以及存在肝素等抗凝血也影响克劳斯法测定结果［5］。PT-del法，是当PT测定完成时，全部Fib均转变为纤维蛋白（相当于在血浆中加入凝血酶），其形成的浓度与Fib含量成正比，由于此法快速、简便、节省试剂，而且一般国外全自动血凝仪均有此功能，因而有些实验室在日常工作中以PT-del法代替克劳斯法测定Fib，然而根据我们的实验室统计，除Fib含量在2～4g/L时，PT-del法与克劳斯法测定结果才无统计学差异，而在Fib>4g/L或Fib< 2g/L的含量范围，两方法差异均有显著性，PT-del法的测定结果偏高，这与国外报道较为一致［6］，故我们建议在常规工作中一般采用克劳斯法，如有凝血仪及相应试剂的单位，可采用PT-del法，但结果发现Fib结果较低或较高，应改用克劳斯法。