医药学论文：药用藻类中多糖对双歧杆菌的促增殖作用

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目的：探索藻类中药中多糖对双歧杆菌的促增殖作用。方法：在恒温条件下，以时间和多糖浓度为影响因素，了解不同藻类中多糖对双歧杆菌的促增殖作用，对其量效关系进行分析结果：实验结果表明在37℃多糖浓度在0到2％范围内，双歧杆菌数随多糖浓度的增加而上升；多糖浓度继续升高，则反而下降。结论：海藻中多糖在一定浓度下能很好地促双歧杆菌生长。

Abstract:
Method: Keep on the temperature. Carry out the experiment with time factor and concentration factor.Analysis the connection of estimate and effect.
Discussion: Polysaccharide of algae can be an efficient proliferative factor to bifidobacteria.
Keywords: Proliferation, Polysaccharide, Bifidobacteria
一、前言
双歧杆菌做为人体肠道内占绝对优势，对人体具有许多重要生理功能的有益菌。随着微生态学的迅猛发展，双歧杆菌的临床保健作用逐渐被人们认识和接受，并对其进行了更深入的研究。

人的生理、免疫、营养、消化、抗肿瘤、抗衰老、药物效能等都离不开人体自身携带的微生物群人体肠道内的双歧杆菌具有有病治病，无病防病和保健的作用，它能形成生理屏障，阻止致病菌的定植和入侵，保护宿主免受致病菌侵害。能改善蛋白质代谢，提供多种B族维生素，能促进钙铁吸收。还能提高免疫力，增强抗肿瘤等多种作用。双歧杆菌的不足意味着人体发生健康危机，需要及时补充。
本实验中的海藻多糖为双歧因子。能促进双歧杆菌增殖所必需的无毒物质称为双歧因子，双歧因子有的是含氮多糖或寡糖，有的是粘蛋白或酶类，有的是肽类或核酸成分其来源充足，分布广泛。
二、海藻多糖促双歧杆菌生长实验
1．样品
海带多糖：利用乙醇沉淀法从海带中提取。
海藻 为马尾藻科植物海蒿子或羊栖菜的藻体。咸寒，归肝肾经，有消痰软坚，利水消肿之作用。《本草纲目》中记载：海藻，现咸能润下，寒能泄热引水，故能消瘿瘤，结核之坚聚，而除浮肿、脚气、痰气之湿热，使邪气自小便出也。
本实验中将用羊栖菜和海带
海带[Laminaria japonica Aresch]属褐藻门海带科，是一种大型食用海藻，有丰富的营养。每100克海带中含有蛋白质8克， 甘露醇14克，钾4.36克、铁150毫克，超过菠菜，油菜几倍至几十倍。更为突出的是，海带富含微量元素碘，每100克海带含碘高达24000微克。
取海藻置于托盘放入恒温培养箱低温烘干，用电磨机打碎，使之成粉末状。用天平称取海藻粉50g放入500ml锥形瓶中加蒸馏水250ml放置于95℃水浴锅中，并隔10min晃一次，4h后取出，冷却到室温。离心取上清液，在离心管中加无水乙醇，得到沉淀再次离心，取沉淀(多糖)，用蒸馏水冲洗数遍，于37度烘箱中烘干所得沉淀为粗多糖。
2．培养基：MRS肉汤培养基：
20％肉汤：蛋白胨1g、肉浸膏1g、蒸馏水1000ml。pH值6.4。
4．实验仪器
S.C.303型隔水式电热恒温培养与试剂
除氧剂，法国生物梅里埃公司
754型紫外可见分光光度计，上海第三分析仪器厂
THZ－82型恒温振荡器，江苏太仓医疗器械厂
（二）实验方法与结果
菌液制备：无菌条件下，从丽珠肠乐胶囊中取出内容物，溶解于10ml浓度为0.9％的无菌生理盐水，搅拌均匀后用接种针蘸取少许溶液，涂布于无菌MRS固体培养基平板上，37℃下，于厌氧培养盒培养3d。再从平板中挑取色泽淡黄、圆滑突起的单菌落，接入40ml MRS液体培养基，37℃厌氧培养2d。取少量培养液，测得菌液浓度为2.7×108个/ml。使用前稀释至1.0×108个/ml备用。
附. 蒽酮硫酸法测定多糖含量
标准曲线的制作：分别取0.1g/L的葡聚糖溶液0.05，0.10，0.20，0.30，0.40，0.60，0.80ml，用蒸馏水补到1.00ml；分别加入4.00ml蒽酮试剂，迅速浸入冰水浴中冷却，各管加完一起进入沸水浴中，管口加盖玻璃球，以防蒸发。自水浴重新煮沸起，准确煮沸10分钟取出，用自来水冷却，室温放置10分钟左右，于620nm比色。以同样处理的重蒸馏水为空白，进行比色。以光密度(OD值)为纵坐标，糖的含量微克数为横坐标，得标准曲线。