- 讲师:刘萍萍 / 谢楠
- 课时:160h
- 价格 4580 元
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1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 仪器
FA1004N电子天平(上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂制造);723分光光度计(上海光谱仪器有限公司);DK-8A型电热恒温水浴槽(上海精宏实验设备有限公司);KDC-40低速离心机(科大创新股份有限公司)。
1.1.2 动物
老年昆明种小鼠20只,雌雄各半,由四军大动物中心提供,统一用四军大动物中心标准食物喂养。
1.1.3 试剂
SOD试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.2 方法
将20只老年昆明种小鼠,雌雄各半,随即分成两组。第一组为正常食量组,自由饮水,第二组为半食量组,即每天供给其正常食量的一半,自由饮水,单笼喂养。30天后采血,肝素作为抗凝剂。对每份抗凝血进行如下操作,取抗凝血50 μl,冲入盛有2~4 ml生理盐水的离心管中,2000r/min、离心3 min。用玻璃吸管吸去上清液,要吸干净,留下沉淀的红细胞。在沉淀的细胞中加入冷双蒸水0.2 ml,混匀使红细胞充分溶解。加入95%乙醇0.1 ml,振荡30 s。加入三氯甲烷0.1 ml置旋涡混匀器充分抽提1 min。3500r/min,离心8 min。取上清液10 μl,按程序进行操作,记录结果。
1.3 统计学方法
实验结果用均数±标准差(x±s)表示,统计资料用t检验进行组间比较。
2 结果
不同食量的老年小鼠红细胞中的SOD活力 见表1。表1 不同食量的老年小鼠红细胞中的SOD活力 (略)注:*P< 0.05,差异有显著性
从表1可以看出,半食量组小鼠红细胞中的SOD活力有显著的增加(P< 0.05)。
3 讨论
超氧化物歧化酶对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用,此酶能清除超氧阴离子自由基(O- ·2),保护细胞免受损伤。机体吸收氧气进行新陈代谢能产生大量含氧元素的自由基,引起不饱和脂酸氧化成超氧化物,形成脂褐素、老年斑,并能使细胞中毒、蛋白质和酶变性,产生DNA突变,诱发肿瘤和降低免疫力,而人体中的超氧化物歧化酶(SOD)能清除和减少这种超氧自由基。从表1可以看出,半食量组小鼠红细胞中的SOD活力有显著的增加(P< 0.05)。那么,其抗衰老能力明显增强,原因可能是,老年小鼠红细胞中SOD的活性不是很高,在全食量喂养的情况下,机体在进行新陈代谢过程中产生的自由基过多,使红细胞中SOD一直处于超负荷状态,长时间就会使该酶的活性降低。半食量喂养的情况下,机体在进行新陈代谢过程中产生的自由基相对地较少,SOD不处于满负荷工作,所以活性较高。
[参考文献]
1 高震.谈抗衰老与SOD清除氧自由基的利弊.生物学通报,1998,33(10).
2 陈瑗,周牧.自由基与衰老.北京:人民卫生出版社,2004,112-113.
作者单位: 712046 陕西咸阳,陕西中医学院
[摘要] 目的 观察半食量对老年小鼠红细胞中SOD活性的影响。方法 通过对全食量、半食量老年小鼠红细胞中SOD活性的测定。结果 发现半食量老年小鼠红细胞中SOD活性明显的增高(P< 0.05)。结论 老年小鼠红细胞中的SOD的活性不是很高,在全食量喂养的情况下,产生的自由基过多,使红细胞中SOD一直处于超负荷状态,长时间就会使该酶的活性降低。半食量产生的自由基相对地较少,SOD不处于满负荷工作,所以活性较高。
[关键词] 红细胞;超氧化物歧化酶;自由基
衰老对每一个生物来说都是要经历的,然而,每个生物其衰老的过程是不同的,同一种生物,其衰老的过程也是不一样的,有的衰老得快,有的衰老的慢。衰老的快慢与体内自由基的堆积有关,自由基的堆积与超氧化物歧化酶(SOD)活性有关[1]。为探讨食量对红细胞的SOD活性有无影响,本实验采用了全食量、半食量对老年小鼠的喂养,观察其红细胞中的SOD有无变化[2],并进行比较,现报告如下。
责编:杨盛昌
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