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一、知识点总结
微生物生长的测定方法有多种,根据研究对象或目的选择。
1.总细胞计数法
血球计数板法:血球计数板中央有一个体积一定的计数室。将菌悬液或孢子悬液在显微镜下计数,然后再按一定公式计算出细菌总数。
涂片计数法:将一定体积的样品,均匀地涂在载片的一定面积内。在显微镜下计算细胞数量,推算1cm2所含细胞数目。
比浊法:菌体细胞培养液混浊,在一定范围内,菌体数量与浑浊成正比,故可通过分光光度计或比色计求出浑浊度,通过与标准曲线对比,求出样品中菌液浓度,算出个体数。特点:所得结果包括死菌和活菌。
2.间接计数法
涂布平板法:用灭菌的涂布器将一定体积的适当稀释度的菌液涂布在琼脂培养基的表面,然后保温培养直到菌落出现,记录菌落的数目并换算成每毫升试样中的活细胞数量。
倒平板法:将样品稀释到一定浓度,取一定体积倒入冷却至45℃的固体培养基混合,制成平板,培养后,出现菌落,由菌落数推算出的菌总数。
滤膜过滤法:样品通过微孔滤膜后,细菌收集在滤膜上,然后将滤膜放在培养基中培养,通过菌落计数求出样品活菌落。
二、记忆小贴士
1.显微镜直接计数法的原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。
2.间接计数法:当样品的稀释度数足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
三、经典例题
对微生物细胞数目进行检测时,不属于总细胞计数法的方法是。
A.比浊法 B.涂片计数法 C.涂布平板法 D.血球计数板法
【答案】C。解析:对微生物细胞数目进行检测时,总细胞计数法的方法有比浊法、涂片计数法和血球计数板法,而涂布平板法属于活菌计数法。因此,答案选C。
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