- 讲师:刘萍萍 / 谢楠
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免疫放射分析与放射免疫分析分别为非竞争和竞争的标记免疫分析方法。其反应原理的不同之处可以从以下六个方面分析。
(一)标记物
放射免疫分析是用核素标记抗原,不同抗原选用不同的核素和方法。免疫放射分析是标记抗体,不同抗体标记方法基本相同。
(二)反应速率
反应速度和反应物浓度成正比,免疫放射分析反应中,标记抗体为过量,且抗原抗体结合为非竞争性,因此反应速度比放射免疫分析快。
(三)反应原理
放射免疫分析为竞争抑制结合,反应参数与待检抗原量成反比,免疫放射分析为非竞争性结合,反应参数与待检抗原浓度呈正相关。
(四)特异性
免疫放射分析采用针对不同抗原决定簇的双抗体结合抗原,反应物受交叉反应物的干扰较仅用单一抗体和放射免疫分析低,测定特异性较高。
(五)灵敏度和检测范围
免疫放射分析反应中,抗原与抗体属非竞争性结合,微少抗原能与抗体充分结合,放射免疫分析中标记抗原与待检抗原竞争,与有限量抗体的结合不充分,故免疫放射分析测定的灵敏度明显高于放射免疫分析。
(六)放射免疫分析所用抗体
放射免疫分析所用抗体为多克隆性,因此对其特异性和亲和力要求较高,但用量很少。免疫放射分析为试剂过量的非竞争性结合反应,对抗体亲合力的要求不如放射免疫分析,但用量大。放射免疫分析可以测定小分子抗原,但免疫放射分析只能测定至少有两个抗原决定簇的抗原。
放射免疫分析常用的放射性核素有:125I、131I、3H、14C等。 | ||
放射免疫分析(RIA) | 免疫放射分析(IRMA) | |
标记物 | 核素标记抗原 | 标记抗体 |
反应速率 | 比较慢 | 比较快 |
反应原理 | 竞争抑制结合 | 非竞争性结合 |
特异性 | 低 | 高 |
灵敏度 | 高 | 低 |
放射免疫分析所用抗体 | 多克隆性,对其特异性和亲和力要求较高,用量很少,放射免疫分析可以测定小分子抗原 | 对抗体亲合力的要求不如放射免疫分析,但用量大 |
免疫放射分析只能测定至少有两个抗原决定簇的抗原。 |
责编:ylm
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