2019湖南医疗招聘-医学基础知识——痢疾的病原学诊断方法

 　对可疑痢疾患者我们要进行如下病原学诊断。

　　常规细菌学诊断：

　　(1)标本尽可能在发病早期和用药治疗前收集粪便的脓血、粘液部分。标本采集后，如不能及时送检，必须置于保存液(甘油缓冲液)中。对留取粪便困难者(如中毒性痢)可采用肛门拭子检查。

　　(2)分离培养将标本立即接种于增菌液增菌培养，转种于选择性培养基，37℃培养18～24h,选取无色半透明菌落,接种鉴别培养基(三糖铁或二糖铁)，37℃18～24h，符合典型反应者，再行详细生化试验和血清学鉴定试验以确立菌群、菌型。非典型的志贺菌可将其接种于豚鼠眼结膜上，观察24h，如有炎症表现，则为有毒菌株。

　　快速诊断：

　　(1)PCR技术：经过治疗的患者，很难分离到可见的细菌时，可采用多聚酶链反应(PCR),检测志贺菌序列以传递性质粒倍增基因来测定志贺菌。

　　(2)协同凝集试验：用志贺菌IgG抗体与Cowanl葡萄球菌蛋白A结合成为诊断试剂，用来测定病人粪便中有无志贺菌可溶性抗原。

　　(3)荧光菌球法：将标本接种于含有荧光素标记的志贺菌免疫血清液体培养基中，如标本中有相应型别的志贺菌存在,37℃孵育4～8h，则与荧光抗体凝集成小球，在荧光显微镜下容易识别诊断。