2019公卫执业医师考试备考考点资料:化学致突变物的检测

 　化学致突变物的检测所观察的现象并不一定就是三类遗传学损伤，而可能是致突变过程中发生的其他作用（事件）。

　　（一）致突变试验的遗传学终点和试验组合的选择

　　将致突变试验观察到的现象所反映的各种遗传学事件称为遗传学终点。遗传学终点分为4类：①基因突变；②染色体畸变；③不分离；④原发性DNA损伤。

　　成组试验组合的原则为：①多个遗传学终点；②原核生物和真核生物；③体外试验和体内试验；④体细胞和生殖细胞。

　　（二）常用的致突变试验方法

　　1.细菌回复突变试验-鼠伤寒沙门菌回变试验（Ames试验）

　　原核生物体外试验、基因突变。

　　鼠伤寒沙门菌试验菌株（突变型）不能自行合成组氨酸，在不含组氨酸的最低营养平皿上不能生长。突变型试验菌株可被各种诱变因素诱导，回复突变成野生型，即恢复了合成组氨酸的能力，可在此平皿上生长成可见菌落。

　　鼠伤寒沙门菌野生型（原养型）←→组氨酸营养缺陷型突变株（his+）　回复突变　（his）

　　如果受试物处理组回变菌落数显著超过阴性对照组；并有剂量反应关系，即可判定受试物为鼠伤寒沙门菌的致突变物。

　　Ames试验中使用的标准菌株为TA97、TA98、TA 100和TA 102.his-突变外，附加突变：①深粗糙型突变（rfa）、②切除修复基因uvrB缺失（△uvrB）和③抗药因子（R因子即抗氨苄青霉素的PKMl01质粒和抗四环素的PAQ1质粒）。

　　TA97和TA98主要用于检测移码型突变；TA100和TA102可检测碱基置换。

　　有点试验和掺入试验两种。应分别进行不加及加代谢活化系统的试验，常用为S9混合液，即用多氯联苯诱导的大鼠肝匀浆经9000 g离心得到的上清液，再加上NADP及葡萄糖-6-磷酸等辅助因子。